手性柱拆分情况咨询

一种物质R型出峰11min左右，S型出峰12.7min左右（两种都是SIGMA的标准品）
把SIGMA标准品R型和S型按照一定比例混合，做成消旋体，手性柱能分开，时间和单独加入出峰的时间比稍微有点出入
但公司买的消旋的这种物质却只在12min左右出一个峰，并没有把两个对映体分开，不知道怎么回事？感谢帮忙！

可能：
1 手性柱本身有问题，能解释不能分开公司买的消旋体，但不能解释能分开SIGMA标准品（手性柱第一次用）
2 条件没有摸好，没有分开公司的消旋体，但能分开混在一起的R型和S型SIGMA标准品，难道这样混合和原来就是消旋体的性质不一样？？
3补充一个问题，用正己烷和异丙醇作为流动相，在小波长譬如215nm情况下，基线是不是不容易走平？

回复 #1 jiqingchun 的帖子

手性柱第一次使用，涉及到柱子的预处理问题，也就是在分析之前，把色谱柱内封柱的溶液逐步缓慢替换成自己的流动相体系。这个过程请严格按照使用说明书上所说的去操作就行了。比如：对于CHIRALPAK AD-H Column，使用之前，请仔细研读一下INSTRUCTION MANUAL for CHIRALPAK AD-H。（每根色谱柱都有带的，就像人的身份证一样）

对于LZ的问题，真的是个奇怪的现象！“把SIGMA标准品R型和S型按照一定比例混合，做成消旋体，手性柱能分开”，请问LZ这个图谱的峰形如何？是否存在前延、拖尾现象，峰是否尖锐对称，峰胖否？（这点可以从一个侧面反映系统是否平衡好）
另外，这两个样品是否完全一样？比如，若SIGMA标准品是什么形态存在的？游离态还是成盐了的？LZ自己的消旋体是否跟标准品的存在形态一致？溶解两个样品的溶剂是否一致？

手性柱使用时，可以使用何种流动相，流动相pＨ，柱温，溶解样品的溶剂等都需要留意滴。。。。

总之，一句话，严格按照每根柱子说明书上所说的去操作就行了，每根柱子都有其特殊之处！

个人直觉，LZ的样品和SIGMA标准品化合物存在形态不一样导致峰分离度不一样，楼主可以这么试试：取自己的消旋体和SIGMA标准品混合物各一份，用相同的溶剂溶解，测定一下各个溶液的pH值看是否有差别？

对的，正相系统，UV检测，通常背景噪音相对较大，不过基线还是可以走平的。我自己手性分析时，在做样前，通常将体系平衡2-3h，（正相手性分离，大都采用等度洗脱方式，因为平衡缓慢，梯度洗脱不合适）

[[i] 本帖最后由 aa_tang 于 2008-11-5 23:57 编辑 [/i]]

非常感谢详细的回复:)

这么详细的回复，这是佩服啊:) :) :)

手性拆分个人感觉挺有意思的，就是因为期间常出现一些令人费解的东西。

[quote]原帖由 [i]我爱学习[/i] 于 2008-11-20 23:21 发表 [url=http://bbs.antpedia.com/redirect.php?goto=findpost&pid=11879&ptid=4237][img]http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif[/img][/url]
手性拆分个人感觉挺有意思的，就是因为期间常出现一些令人费解的东西。 [/quote]

是啊，有同感，手性分析让人觉得很有意思。aa_tang的回复让人学习了很多啊。