小中大可能有如下原因:
1。2000的毒性是很大,但效率还算可以,如果影响实验的话建议换其他脂质体,罗氏的脂质体是很不错的,可以考虑;
2。转染不进去,或是转染效率低,个人认为质粒与脂质体比例很重要,LZ有没有测浓度,有没有准确稀释,时间长浓度会不会变。。。这些问题都需要LZ考虑,浓度差一点,比例变了,对转染效率的影响是很大的;
3。LZ摸的是脂质体浓度么?个人认为意义不大,脂质体都是商业化的产品,照说明书上的比例做应该问题不大;
最后,没有荧光还是荧光很低,如果为了确定质粒有没有转入,建议你设计一段LUC引物做一下PCR,这样就能确定你有没有转进去还是因为检测的问题,如果换脂质体后转染效率依然很低,那就说明这个细胞不使用这种+-电荷结合的脂质体,可以考虑电转。应该问题不大,再试试吧!