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标题:[讨论帖]哺乳动物细胞的无血清大规模培养

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发表于 2012-2-4 09:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[讨论帖]哺乳动物细胞的无血清大规模培养




我们实验室在使用瑞士Cell Culture Technologies无血清无蛋白培养基培养293,BHK-21,CHO细胞,目前已进入摇瓶悬浮状态.下一步准备进入5升工作体积的贝朗反应器. 感兴趣的,可以参加讨论.探讨一下.有经验的可以交流一下.
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发表于 2012-2-4 09:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

效果如何？我们也在考虑用这样的办法，希望能给些建议，如温度、转速、细胞密度等。谢谢
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 小中大

无血清无蛋白培养基培养BHK-21,准备进入5升工作体积的贝朗反应器了吗?我对此比较感兴趣,这几年我一直在搞细胞大规模培养,可以交流一下经验
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 小中大
效果如何？我们也在考虑用这样的办法，希望能给些建议，如温度、转速、细胞密度等。谢谢

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请问你是指哪一类细胞呢?
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发表于 2012-2-4 09:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
无血清无蛋白培养基培养BHK-21,准备进入5升工作体积的贝朗反应器了吗?我对此比较感兴趣,这几年我一直在搞细胞大规模培养,可以交流一下经验;

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是的,目前在摇瓶里生长的非常好,年底反应器就会到.如果效果不错,还会继续放大.我们用的是CD(成分限定的培养基)培养基.很不错的
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 小中大
效果如何？我们也在考虑用这样的办法，希望能给些建议，如温度、转速、细胞密度等。谢谢

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另外,你们现在是用血清养,还是已经进入无血清阶段?前期的适应阶段非常重要的.
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发表于 2012-2-4 09:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这样的细胞(BHK-21)能用来接毒,以及产毒试验做过吗?
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woshituzhu[使用道具]
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发表于 2012-2-4 09:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
从事细胞培养有些时间了，所使用的是生产用的300L、100L、30L、5L的反应器，在使用过的反应器中，以电加热的最为稳定。
就针对以上实验说点体会
1、进罐前如有条件可以在转瓶中培养些时间，让细胞适应一下转速。
2、细胞接种后的密度最好不低于0.3
3、转速根据浆叶的角度来定，我处，夹角45度，转速80－100。
4、通气选用微孔，在进细胞前应将AirF设置好，保证生物反应在培养过程中处于正压状态，辅助培养液中的溶氧。
5、PH值、溶氧通过气体混合仪控制，在设定压力一般为0.5bar，流量不宜过大，否则在通气时会产生大量泡沫。
6、如使用消泡剂，一定选购细胞培养用的，并且在罐外做好细胞所能耐受的最大剂量。
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发表于 2012-2-4 09:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这样的细胞(BHK-21)能用来接毒,以及产毒试验做过吗?

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没有问题了。
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发表于 2012-2-4 09:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

看来，有很多群友都在这一战线上努力。目前国内确实有许多单位都在研发和生产当中，但规模不大。只有几个规模还可以。但大多数申报的产品还是二类新药，但这已经很好了，如果可以扩大规模，至少可以把国外很贵的药价格降下来。所以，我想通过我们共同的努力，我想在很短的时间内，是可以克服这些难关的。

我也看了cccDNA以前的论坛，确实不错。还有“wjg”的发言，对我们帮助很大。我想，我们现在最好把讨论的内容集中一下，因为每个人的进度还是不一样的。初期，我想大家能否集中在细胞的驯化上，即从有血清（或拿到无血清培养的细胞株）到上反应器之前的培养。我想对于想做的人很有帮助，对于已经到反应器的朋友，可以总结一下。因为，我想上游的工作，有些是不原公开的。但这一块是没什么的。我们先讨论侃侃。

主要围绕：CHO，293，杂交瘤，BHK-21细胞吧。

另外，如果想买反应器，我想主要是：贝朗B.BRAUN，和比欧（Bioengineering），贝朗的贵一些，但在中小体积的时候效果不错。比欧的要便宜，而且是最容易放大的，他们也有厂房建设的经验（贝朗没有）。
Infors反应器便宜，主要适合原核培养。NBS反应器，只适合小规模，致命弱点，没法放大！
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