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标题:【求助】用EP管装标本放液氮里让自己很后悔伤心...

zhezhe[使用道具]
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我们也在液氮中放置提取的标本,虽没有碰到过类似的问题,但是每次取样品都会战战兢兢的!我们很理解楼主的心情,继续努力!还有谢谢大家的建议与意见,为我们以后的试验提供了保证!
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dog002[使用道具]
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终于把所有的管子都安全转移了,虽然这个帖子已经沉了,但要兑现自己的承诺,写下来,以让后来的师弟师妹们有个参考意见:
根据楼上各位热心给出的意见,我决定还是放-80°,我还有两布袋子的标本(那种长长窄窄的自制布袋),当时由于罐口小,两个布袋子挤在一起,我用力用镊子拽住一个使劲往外拉,液氮中泡久了布变得很脆,一个布袋子被我撕断了,绑绳子的袋头被我捞出来了,所有的小管子都随剩下的袋子散了下去。
换了个长长的洗试管的刷子,把破了的袋子捣下去,这样才顺利的把另一个布袋一下抽了出来。我们是两个人,一个人把布袋提出来,一个人就迅速打开-80°冰箱,把布袋放了进去。放的瞬间听到了布袋发出嗤嗤的声音,快快关上冰箱门,等了5分钟。时间过的好慢啊,一点动静我都很敏感,还好,没有炸。
我的液氮罐是10L的,里面大概还有1/3的液氮,想把布袋子捞出来,可是液氮汽化的白色让我们不可能看到什么,于是找了个小些的液氮罐把液氮转移,可结果是小管子都从布袋子里跑出来,流向另一个液氮罐了,索性用铁钩伸进去把布袋拉破,让所有的小管子进入另一个罐子。
然后分了好几天,每天从那个小些的液氮罐里倒出些管子进入不锈钢保温杯,然后用镊子从保温杯中捏出管子放进冰箱,我们一次倒出4-6个,然后等待2分钟,没有声音,再倒出4-6个...当冰箱温度下降到<-70的时候就不倒了,不然会对别的同学的标本保存造成不利,收工,等第二天再重复这样的事情,终于,最后所有的管子都放好了,长长出了一口气。
我不知这就是事情的解决办法,还是凭了运气(因为我收集的还是有很多冻存管装的,而且从一个液氮罐往另一个倒的时候掉在地上了几个EP管,侥幸没有裂),但是有一点清楚的是放在-80要比取出直接常温爆裂率要小很多,会降低些损失。
与大家共勉!
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fox_79[使用道具]
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终于把所有的管子都安全转移了,虽然这个帖子已经沉了,但要兑现自己的承诺,写下来,以让后来的师弟师妹们有个参考意见:
根据楼上各位热心给出的意见,我决定还是放-80°,我还有两布袋子的标本(那种长长窄窄的自制布袋),当时由于罐口小,两个布袋子挤在一起,我用力用镊子拽住一个使劲往外拉,液氮中泡久了布变得很脆,一个布袋子被我撕断了,绑绳子的袋头被我捞出来了,所有的小管子都随剩下的袋子散了下去。
换了个长长的洗试管的刷子,把破了的袋子捣下去,这样才顺利的把另一个布袋一下抽了出来。我们是两个人,一个人把布袋提出来,一个人就迅速打开-80°冰箱,把布袋放了进去。放的瞬间听到了布袋发出嗤嗤的声音,快快关上冰箱门,等了5分钟。时间过的好慢啊,一点动静我都很敏感,还好,没有炸。
我的液氮罐是10L的,里面大概还有1/3的液氮,想把布袋子捞出来,可是液氮汽化的白色让我们不可能看到什么,于是找了个小些的液氮罐把液氮转移,可结果是小管子都从布袋子里跑出来,流向另一个液氮罐了,索性用铁钩伸进去把布袋拉破,让所有的小管子进入另一个罐子。
然后分了好几天,每天从那个小些的液氮罐里倒出些管子进入不锈钢保温杯,然后用镊子从保温杯中捏出管子放进冰箱,我们一次倒出4-6个,然后等待2分钟,没有声音,再倒出4-6个...当冰箱温度下降到<-70的时候就不倒了,不然会对别的同学的标本保存造成不利,收工,等第二天再重复这样的事情,终于,最后所有的管子都放好了,长长出了一口气。
我不知这就是事情的解决办法,还是凭了运气(因为我收集的还是有很多冻存管装的,而且从一个液氮罐往另一个倒的时候掉在地上了几个EP管,侥幸没有裂),但是有一点清楚的是放在-80要比取出直接常温爆裂率要小很多,会降低些损失。
与大家共勉!
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chengjie79[使用道具]
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放样品前,现在空管上用针头扎个小洞,这样就不会“爆炸”了。
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dior[使用道具]
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尽量不要把EP管直接放入液氮中,即使是进口的EP管,于液氮中还是非常可能变形,液氮进入管中,取出时转为气态,压力迅速升高,非常容易爆。这不仅对标本是一种损失,最重要的是威胁到人的安全,所以应该戴面罩及防冻手套等保护措施。
我们都使用进口的冻存管(贵一些),会安全很多。
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october7[使用道具]
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取样时EP管要盖紧才能放进液氮罐,液氮进入EP管取出时就容易爆
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am10[使用道具]
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我冻融过也许多次了,没有发生过爆的问题,冻存管都是用封口膜封的。我冻得细胞融时都是直接放入37度水浴,没出现过问题
我不建议渐融,我认为这样做会丧失活性
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fox_79[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 am10 于 2015-7-2 17:49 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

我冻融过也许多次了,没有发生过爆的问题,冻存管都是用封口膜封的。我冻得细胞融时都是直接放入37度水浴,没出现过问题
我不建议渐融,我认为这样做会丧失活性 ...

说的有道理,可是短时间放在-80度我想也是可取的,不是还有种储存方法是在液氮中迅速冷冻后马上放入-80°冰箱吗,对不?我的试验基本上快结束了,从结果上看,标本还是基本上没有受显著影响的。
有一点我蛮想不通,有人说管口一定要密封,还有人说要戳小洞,到底应该怎样呢?
不过我爆裂的管子中也有用蜡膜封过的,而且曾经出现裂痕但没有爆开的EP管,从-80度取出后也出现过爆裂的情形,大家试验一定要小心,保护好自己!
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xevin[使用道具]
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下次再放液氮可要戴防护眼镜,太危险了,生命最重要。
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u234[使用道具]
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看过以上帖子,发现液氮使用真是挺恐怖。我现在是用液氮冻存组织,还好是用锡箔纸包裹,随后液氮研磨提取RNA,但每次从液氮罐往外倒液氮时,都会有少量喷溅出来,溅到脚上或手上,针扎的感觉,恐怖恐怖
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