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标题:【求助】抗凝血DNA的提取

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发表于 2015-8-31 18:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】抗凝血DNA的提取


本人要做抗凝血DNA的提取（EDTA抗凝），但是我想问一下可以库存后再做么？可以在-20度放多久？需要特殊处理么？有无实验步骤发来？谢谢！
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发表于 2015-8-31 18:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

可以库存的。最好在－80度。
一般不需要特殊步骤，冻溶之后按照正常提取DNA的步骤来做就可以了
我是做PCR的，应该没问题
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发表于 2015-8-31 18:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

千万不要用肝素抗凝，那样PCR做不出来的
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发表于 2015-8-31 18:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

谢谢！那么我们没有-80度冰箱，只有-20度的怎么办？
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 小中大

谢谢！那么我们没有-80度冰箱，只有-20度的怎么办？
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发表于 2015-8-31 18:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们这儿的科室做HLA分型时，正是用EDTA抗凝的全血提取DNA。我们一般先将标本分装成2～4个EP管，冻存于零下20度冰箱中，存放时间很长，半年没问题，只要不是反复冻溶全血标本就可以了。
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发表于 2015-8-31 18:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

DNA非常稳定的，特别是只需要它做PCR的时候，因为这时对DNA的完整性要求不高（有人为了提高PCR效率，特别将基因组DNA打断或酶切一下）
DNA酶在－20℃没有活性的，放心好了。
我曾经有几管EDTA抗凝血，在4°C放了一个多月，PCR非常好。
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发表于 2015-8-31 18:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 H2O 于 2015-8-31 18:15 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

千万不要用肝素抗凝，那样PCR做不出来的

我觉得不一定，我们用的抗凝剂都是肝素，但PCR效果也不错的。
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发表于 2015-8-31 18:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

可以库存. 如短期内提取，可以存放在-20冰箱。但如果近期不提，最好存放在
-80度冰箱，保险些。
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H2O[使用道具]
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 小中大

我用肝素抗凝的做过，平均只有20％出结果，其余都没有结果！
用EDTA抗凝的，全有结果
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