小中大最近也在做转染,用24孔板,之前做了2次都不匀,之后就越来越好了。细胞悬液加到板子里后流动,碰壁后受阻力沉到板子底,如果加液体时往板子中央加,这时细胞往周边流动,就倾向与沉到孔的四周,所以我的方法是:
1、消化一定要充分,保证细胞打散成单个
2、有的战友说十字型晃板子,这样晃后细胞很容易聚到中间,导致中间密,周边稀,我不建议这样做
3、加细胞悬液时尽量慢并轻的贴着孔壁,这样细胞慢慢铺散开会相对匀
4、种完板子后静静等2分钟,待细胞沉下去后在镜下观察,如果不满意就轻轻用吸管吹打,注意抽吸一定尽量轻,避免气泡产生
我就是这么做的,现在种板子是越来越匀啦,祝大家好运:)