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1,需要尽可能快的把组织放到液氮中速冻,否则会导致Rna的部分降解,时间当然是越短越好。
2,我不知道你取下的是什么组织,但一般情况下是不用清洗的。
3,冻存管不用任何的处理就可以。
4,你可以把冻存管先装入液氮,然后把取下的组织投入冻存管的液氮中,在管中的液氮未挥发尽前投入装有液氮的保温瓶中,然后放于-70c就可以。这样就不会粘到管壁上了。
5,在我看来,不作DEPC处理应该不会影响最后的结果,因为你的组织在接触冻存管的过程中都是在极低温度下,即使有Rnase,在这种温度下其也不会有活性。在提取Rna的过程中注意防止降解就可以了。