细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » [讨论帖]免疫细胞或组织化学染色的相关问题

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 288  14/29 |‹‹‹12131415161718192021›››|
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:[讨论帖]免疫细胞或组织化学染色的相关问题

园丁##[使用道具]
超级版主
Rank: 8Rank: 8


UID 74049
精华 0
积分 1981
帖子 3179
信誉分 101
可用分 16786
专家分 10
阅读权限 150
注册 2011-10-4
状态 离线
131

发表于 2012-3-13 13:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
50％明胶（细胞）封片。细胞用中性树胶不行吗?我们这里有几个人封了还可以

———————————————————————————————

前者可以为种在24孔板中的细胞封片；后者则是为细胞爬片封片。
顶部
园丁##[使用道具]
超级版主
Rank: 8Rank: 8


UID 74049
精华 0
积分 1981
帖子 3179
信誉分 101
可用分 16786
专家分 10
阅读权限 150
注册 2011-10-4
状态 离线
132

发表于 2012-3-13 13:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
Q：0.3% Triton X100 可以在加羊血清封闭液封闭之前单独孵育吗？
A：当然可以。30min就行！

那抗体稀释的时候还用你那个配方吗,那岂不是把细胞打的千疮百孔,形态很差了?

———————————————————

电镜时肯定不行，但是免疫染色无碍！
活细胞肯定不行，但是固定后无碍！
顶部
feima+[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 77651
精华 0
积分 424
帖子 547
信誉分 100
可用分 3561
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-19
状态 离线
133

发表于 2012-3-13 13:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
再请问多聚赖氨酸处理玻片时是不是将玻片及多聚赖氨酸均灭菌处理完毕后，再在超净台上涂上？之后才放入孔板中？
我曾经在2％多聚甲醛中加入0.3%Triton-X-100固定细胞30分钟，但染色后发现原本胞浆中的抗原进入了胞核，据师兄师姐说是Triton打孔所致，不应使用。不再使用后就未再出现此种现象。而且我们实验室做组化从无人使用Triton，我见主任介绍的方法中都要用到，不知是否该用？
谢谢
顶部
hyuu[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79232
精华 1
积分 626
帖子 847
信誉分 102
可用分 5149
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-12-8
状态 离线
134

发表于 2012-3-13 13:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

博士德公司的产品假阳性率比较高，特别是多克隆抗体，如染色效果不理想可换一抗。作免疫组化染色时所有的试验步骤都只供参考，具体细节有些时候更需要自己多去摸索。铬矾明胶粘片显得较脏，建议用多聚赖氨酸，此外铬矾明胶粘片时切片经酶消化修复或柠檬酸缓冲液加热修复时脱片现象严重。作冰冻切片染色时需注意，粘片后不能干燥时间过长，建议不要超过2小时（室温时），时间过长会造成抗原丢失，这种情况可试用甲酸修复。切片干燥后如一段时间内不作组化染色，建议置于-20度冰箱保存。
顶部
jrwyyplt[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 79380
精华 1
积分 406
帖子 488
信誉分 102
可用分 3193
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-12-10
状态 离线
135

发表于 2012-3-13 13:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我是做骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化，想通过免疫组化实验来鉴定分化的细胞，不知具体方法是什么，特请教。谢谢
顶部
skytree[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76459
精华 0
积分 372
帖子 444
信誉分 100
可用分 3026
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-5
状态 离线
136

发表于 2012-3-13 13:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


本人欲做细胞组化。因为我的细胞帖壁需要明胶铺板，不涂多聚赖氨酸是否可行，对以后的细胞免疫有没有影响？ 谢谢！
顶部
lagua123[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 77374
精华 0
积分 437
帖子 533
信誉分 100
可用分 3511
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-16
状态 离线
137

发表于 2012-3-13 13:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请教一下，我可不可以通过细胞免疫组化来检测两个细胞中的同种蛋白表达差别？是否可以看强度
顶部
园丁##[使用道具]
超级版主
Rank: 8Rank: 8


UID 74049
精华 0
积分 1981
帖子 3179
信誉分 101
可用分 16786
专家分 10
阅读权限 150
注册 2011-10-4
状态 离线
138

发表于 2012-3-13 13:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 lagua123 于 2012-3-13 13:23 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

请教一下，我可不可以通过细胞免疫组化来检测两个细胞中的同种蛋白表达差别？是否可以看强度

western blot 是不是更好一些？
顶部
园丁##[使用道具]
超级版主
Rank: 8Rank: 8


UID 74049
精华 0
积分 1981
帖子 3179
信誉分 101
可用分 16786
专家分 10
阅读权限 150
注册 2011-10-4
状态 离线
139

发表于 2012-3-13 13:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
本人欲做细胞组化。因为我的细胞帖壁需要明胶铺板，不涂多聚赖氨酸是否可行，对以后的细胞免疫有没有影响？ 谢谢！

————————————————————————————————————————————————————————

明胶和多聚赖氨酸都是促进细胞贴壁的基质，如何选择根据自己的实际情况而定！他们对细胞免疫一般是没有什么影响的！
顶部
园丁##[使用道具]
超级版主
Rank: 8Rank: 8


UID 74049
精华 0
积分 1981
帖子 3179
信誉分 101
可用分 16786
专家分 10
阅读权限 150
注册 2011-10-4
状态 离线
140

发表于 2012-3-13 13:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我是做骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化，想通过免疫组化实验来鉴定分化的细胞，不知具体方法是什么，特请教。谢谢

——————————————————————————

骨髓间充质干细胞和软骨细胞的marker分别是什么？
顶部
 288  14/29 |‹‹‹12131415161718192021›››|