细胞世界

上述组化步鄹是组织切片的，而对培养的细胞则比较简单：（细胞最好种在玻片上）

1。固定液固定10－30min，0.01MPBS清洗2min×3；

2。羊血清封闭液封闭（可以加入0.3% Triton X100 ）30－60min分钟；

3。加入用血清稀释液（牛血清白蛋白1.00g＋0.01MPBS 100ml＋叠氮纳0.08g＋30% Triton X100 1ml）稀释的第一抗体室温反应1－2h或4℃过夜。吸去抗体，0.01MPBS洗2min×3；

4。加入血清稀释液或0.01MPBS稀释的二抗，室温孵育1h。吸去二抗，0.01MPBS洗2min×3；（如果是荧光二抗就可以直接用50％甘油封片，进行观察了）

5。加入ABC复合物，室温孵育1h，0.01MPBS洗2min×3，蒸馏水迅速冲三次；

6。加入硫酸镍铵溶液（DAB 25mg＋蒸馏水50ml＋硫酸镍铵醋酸缓冲液50ml＋葡萄糖200mg＋氯化铵40mg＋葡萄糖氧化酶1mg），进行免疫细胞化学显色，时间不超过30min。不时在显微镜下进行观察，待细胞着色而背底颜色较淡时马上吸去显色液，蒸馏水迅速冲三次后加入0.01MPBS终止反应；

或直接加入配好的DAB溶液进行显色。

7。梯度酒精（70％、80％、90％酒精5min×1，95％酒精5min×2，100％酒精5min×3）脱水之后，50％明胶封片。

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你好。请问细胞爬片固定完之后应该如何保存？-20度直接冻可以吗？谢谢