细胞世界

【求助】急！我现在要培养杂交瘤细胞，但是不知道用高糖的还是低糖的DMEM培养基，请大家帮帮忙。谢谢！！

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我在文献上看到是用低糖的MEM培养基，如果你用DMEM的话，因为DMEM和MEM成分区别并不是糖的多少，二者都不含糖，所以建议你还是用低糖的DMEM。

试着回答；
1.细胞接种密度。原代培养的分离细胞在初次接触体外环境时，虽然被分散成单个细胞，但它们之间的相互影响还时存在的，而且这种相互影响对细胞能否存活时非常重要的，因为在这些细胞之间能产生出一些促生长的活性物质，使细胞彼此之间相互促进存活和生长。
如果接种密度过低，这种促生长作用很小，虽然营养物质充足，也很难使细胞适应独立的生存环境。
如果接种密度过高，这种作用很大，会导致营养物质供应不足，代谢废物积累较快要经常换液和传代。
2.对于贴壁依赖型细胞来说，尽快使接种的细胞贴壁，是保持细胞活性的关键。
3.注意是否有细菌、真菌污染，一旦发现要及时清除，否则影响细胞生长。
4.随着培养的进程，要注意换液和传代。一般细胞2－3天换液一次，生长融合达到80％以后就要进行传代了。
欢迎讨论

我早期实验中曾经使用过ecv304细胞，但是现在都否定了ecv304 是内皮细胞来源，所以首先如果您也想用ecv304，快快放弃；我阅读了大量这方面的文献，有以下几点：
1 一般诱导凋亡的浓度从15-40mmol/L,但是我认为如果研究内皮细胞凋亡在糖尿病血管病生理中的作用， 请不要用过高的浓度，因为这并不符合和模拟体内的情况，同时渗透压的改变就不能忽视；
2 诱导时间从24-96H均有；
3 我做细胞试验时，我掌握的原则是如果只是继代培养用于扩增，我会选择添加10-20% 的血清，但是在进行试验时，我会降低血清的浓度，维持细胞生存即可，目的是减少血清中各复杂成分的影响。