[总结帖]细胞版疑难帖 - 经验共享

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标题:[总结帖]细胞版疑难帖

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261

发表于 2012-8-31 12:23 资料个人空间短消息加为好友

小中大

有人做成功过的：
1.对培养的细胞鉴定为HUVEC的情况下，再将生长良好的内皮细胞以
2.5×105/ml接种于6孔板，2ml/孔，待细胞形成单层近融合后，换以细胞维持培养液24h。然后将培养细胞分为2组，一组为高糖组，加入33.3mmol/L葡萄糖，每组设5～6平行孔，培养72h后，就可以进行凋亡定量检测了。另一组为对照组加入葡萄糖5.5mmol/L。
2.建模型时所需的血清和ECGs的浓度应该是仍然维持原培养HUVEC的培养条件，看你是具体采取什么培养方法了，有文献中提到是DMEM培养基89％，胎牛血清10％，100×双抗1％，所加内皮细胞生长因子（ECGF）浓度为
200ng/ml。
不知道是不是你所要的
欢迎讨论，仅供参考。

u234[使用道具]
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262

发表于 2012-8-31 12:24 资料个人空间短消息加为好友

小中大

EPC培养,急切需要EBM-2 (Clonetic),但是不知道哪里可以买到.希望各位前辈帮忙!!!

————————————————————————————————————————————————————————————————

一般国外文献上提到的内皮祖细胞（EPC)培养基EBM-2,其实都是添加了
singlequote（一些细胞因子、胎牛血清、抗生素）的，称EGM-2.所以直接买EGM-2也是可以的，不过EBM-2和EGM-2，以及配套的singlequote北京毕特博生物技术有限责任公司都有代理。

dongdongqiang[使用道具]
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263

发表于 2012-8-31 12:24 资料个人空间短消息加为好友

小中大

在设计一课题时,想明白一下可能的情况,请有此经验的朋友帮忙提出些意见,谢谢!
请问:在体外培养的细胞时,当加入配体作用于细胞时,其膜上或核上的受体表达水平一般是上调的,还是下调?或者是呈一作用的抛物线,先高后低?或是?
比如:维生素D作用于VD受体时,甲状腺激素作用于其受体时,CK作用于其CKR时?哪里可以看到这方面的知识?

ending[使用道具]
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264

发表于 2012-8-31 12:25 资料个人空间短消息加为好友

小中大

要看具体受体与配体的吧？

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265

发表于 2012-8-31 12:25 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 dongdongqiang 于 2012-8-31 12:24 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

在设计一课题时,想明白一下可能的情况,请有此经验的朋友帮忙提出些意见,谢谢!
请问:在体外培养的细胞时,当加入配体作用于细胞时,其膜上或核上的受体表达水平一般是上调的,还是下调?或者是呈一作用的抛物线,先高后低 ...

谈一下：
配体作用于受体时，一般说来要看细胞外面配体的浓度，也即配体能够作用于受体的强度，如果一般是浓度高的，作用时间长又是连续性的，那相应受体表达就会下调；相反，配体浓度较低，作用时间短，又是间断作用于配体的，那么相应受体表达水平就会上调。一个明显例子就是甲亢病人的T3 和T4水平是下调的。
你可以多看看生理、生化有关这方面的内容，我的印象中。
个人拙见，欢迎讨论。

junjie05[使用道具]
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266

发表于 2012-8-31 12:29 资料个人空间短消息加为好友

小中大

最近在翻译一片文章，是关于z纳米技术在细胞毒理学方面的应用的。
不知下句如何翻译，请高手帮帮忙：
Nanoelectromechanical systems(NEMs) oscillators are resonant frequency-based detection sensors that sense changes in an established resonant frequency based on t..he mass applied.These sensors can be used as a mass-based biosensor by applying capture antibodies albe to bind a specific organism to the oscillator.

eric930[使用道具]
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267

发表于 2012-8-31 12:38 资料个人空间短消息加为好友

小中大

回复 #267 junjie05 的帖子

在翻译之前，要明白几个比较不常用的词：
1、nanoelectromechanial“纳米机电仪器”一个美国人新造的名词，参见
cuturl('http://www.cpenet.org.cn/cpe_news/news_show1.asp?newsid=123')
2、 mass-based ：以数量为基础的，参见
cuturl('http://www.ndu.edu.tw/new/koei/upload/%AB%E1%B6%D4%AA%F8%C3@%AE%C4%C0%B3.htm')
所以，整句话翻译成：纳米机电仪器系统传感器是以共振频率为基础的探测仪，能根据其适用范围内的物体的已知共振频率来检测物体的内部变化。这些传感器是以数量为基础的，可以被用来捕获结合在特定有机体上的抗体。
仅供参考。

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268

发表于 2012-8-31 12:38 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我们用的是Nikon 2000U,观察的时候400倍下就有标尺，想给细胞照片上画上标尺，那么，照片上的一厘米是不是对应者目镜里一厘米的标尺？急盼回复！望高手指教！

ROSE李[使用道具]
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269

发表于 2012-8-31 12:40 资料个人空间短消息加为好友

小中大

回复 #269 2541 的帖子

显微镜标尺有两种，一种是目镜标尺，一种是物镜标尺。可以单独使用，也可以一起使用，用于校准显微镜。
我们常用的是目镜标尺。它的一厘米要乘以物镜的倍数，如你所说，在400倍的时候，物镜为40倍，那么你就是要把一厘米扩大了40倍。换句话说，你看到标尺上一厘米，实际细胞的大小为1/40厘米了。可以理解把
如果使用的是物镜标尺，标尺上的刻度就是细胞的实际大小了

shenkunjie[使用道具]
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270

发表于 2012-8-31 12:41 资料个人空间短消息加为好友

小中大

马上做实验了，心肌细胞分离过程中由于受经费的限制不能用流式细胞术进行分选和收集，请教有没有更便宜的方法进行这一工作呢，具体操作是怎样的呢？同时在分离后怎样对其进行除菌呢？小弟在此谢过了！

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