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标题:【讨论帖】western blot问题解答

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发表于 2013-2-5 10:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 NBA 于 2013-2-5 10:52 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')


膜是不是过期了

新订的啊！

我跑两块胶，电泳时间还是一样，但是转膜时，一起转，到时候先把转时间短的膜拿出来，再继续转时间长的那块膜么？？？

给点建议行吗
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发表于 2013-2-5 10:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 yjf1026 于 2013-2-5 10:52 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')


新订的啊！

我跑两块胶，电泳时间还是一样，但是转膜时，一起转，到时候先把转时间短的膜拿出来，再继续转时间长的那块膜么？？？

给点建议行吗 ...

是的
时间长的继续转
拿的时候小心
最好把分子量小的放一块上，大的放一块，这样拿的时候就不会碰到剩下还要继续转的那块了
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发表于 2013-2-5 10:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 NBA 于 2013-2-5 10:53 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')


是的
时间长的继续转
拿的时候小心
最好把分子量小的放一块上，大的放一块，这样拿的时候就不会碰到剩下还要继续转的那块了

今天又郁闷了，倒胶倒了一天，什么稀奇古怪的事都碰到了。漏胶，胶不平，凝了的胶像海浪状。
海绵洗了是湿的不好用，在上面垫的塑料袋，还是漏，玻璃虽说不是很好，但不至于这么大影响啊，以前很少碰到这种情况，哎。基本功啊基本功
倒胶也成问题了。
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发表于 2013-2-5 10:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 yjf1026 于 2013-2-5 10:53 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')


今天又郁闷了，倒胶倒了一天，什么稀奇古怪的事都碰到了。漏胶，胶不平，凝了的胶像海浪状。
海绵洗了是湿的不好用，在上面垫的塑料袋，还是漏，玻璃虽说不是很好，但不至于这么大影响啊，以前很少碰到这种情况，哎。基本功啊基本功
倒 ...

呵呵
做实验别急
想当年我配胶配了好几个月
继续努力
会越来越好
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发表于 2013-2-5 10:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 NBA 于 2013-2-5 10:54 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')


呵呵
做实验别急
想当年我配胶配了好几个月
继续努力
会越来越好

谢谢老师，有倒胶的经验千万和我讲讲，今天真的郁闷了。我都开始怀疑是不是配胶液的问题了，是博士德的试剂盒。以后自己配算了
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 小中大


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原帖由 yjf1026 于 2013-2-5 10:54 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')


谢谢老师，有倒胶的经验千万和我讲讲，今天真的郁闷了。我都开始怀疑是不是配胶液的问题了，是博士德的试剂盒。以后自己配算了

漏胶要看玻璃板及胶条是不是出现问题了
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发表于 2013-2-5 11:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

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原帖由 NBA 于 2013-2-5 10:54 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')


漏胶要看玻璃板及胶条是不是出现问题了

谢谢老师

进口抗体已经回来了，但是说明书都说要求一抗4C 过夜，但也有人说37C一小时也行，甚至不摇，直接放在37C 温箱中，呵呵。我一般都是用BSA稀释后过夜的。到底有区别么？那种方法好些？
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发表于 2013-2-5 11:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

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原帖由 yjf1026 于 2013-2-5 11:01 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')


谢谢老师

进口抗体已经回来了，但是说明书都说要求一抗4C 过夜，但也有人说37C一小时也行，甚至不摇，直接放在37C 温箱中，呵呵。我一般都是用BSA稀释后过夜的。到底有区别么？那种方法好些？ ...

有条件5%BSA
4度过夜
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发表于 2013-2-5 11:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

相关疾病：
心肌梗死

==============

有条件5%BSA
4度过夜

=====================================================================================

谢谢老师，我的实验方案84，91，113的蛋白跑一块胶，350MA转一个半小时，不短吧？2小时会不会更好些？

另外还有26，43的蛋白跑一块胶，350转40MIN。但是我担心26的会转过了，有必要调整不
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原帖由 utt0989 于 2013-2-5 11:04 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

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心肌梗死

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有条件5%BSA
4度过夜

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谢谢老师，我的实验方案84，91，113的蛋白跑一块胶，350MA转一个半小 ...

84，91，113这三个分不开

26，43可以分开，不会转过
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