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我最近做WB，一直纠结在内参上。
我做的是一株转染miRNA后的大肠癌细胞株，用的是GAPDH做内参，目的蛋白每次都跑的非常漂亮，内参却要么没有，要么曝光十几分钟还是非常弱，没做任何处理的一组细胞也是这个情况。一开始以为是我的抗体有问题，换了师姐的（她前几天刚做过的）用，还是不行。后来实在不行，我就换了beta-actin，结果显色出来了。
难道是这个细胞株里GAPDH表达微弱？我于是做了四株没做任何处理的大肠癌细胞的WB，我上面做的那株细胞确实是GAPDH比其他三株弱非常非常多，几乎就没有。
不知道各位战友们有没有遇到过这种问题？这株细胞怎么会不怎么表达GAPDH呢？
还是我实验操作过程中存在某些失误？
恳请高手帮忙解释呀！
