小中大我今天做wb,转膜没问题,最后显影的时候,可能没加2号液,也可能加了,溜号了,30分钟曝光后片子上就可以见到浅浅的带,不仔细看就什么都没有(一点东西都没有,背景都没有),请问1)如果只加1号液,能显影么,2)如果不是忘记加2号液了,还会是什么原因,最近换奶粉了,不过也是脱脂的,新打开的3)如果是忘了加2号液,怎么重复使用膜呢,是stripping还是wash就可以了
不好意思问题有点多,谢谢
补充一下,2个月前做的同样的wb都有很好的结果,是什么问题呢
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1,你说的1、2号液是不是ECL的A、B液啊?抑或是稳定剂与发光剂,名称不同
2,有条件使用BSA
3,直接Wash后重新加ECL孵育,没问题的
4,两个月前与现在的不能做确切的比较,只能做参考,抗体活性会下降,样品会讲解
你用的条件也会有一些不一样(如试剂等或者ECL换了灯)祝你实验顺利