蛋白质与蛋白组学

如果用PVDF膜作斑点印迹，是否可直接点样，还需要用甲醇浸泡吗?

===============================

没有活化的PVDF膜是媳妇不上蛋白的

目的蛋白是什么？
我以前用santa的抗体很多
但是近期看大家的言论觉得santa的抗体好像有一定问题

===================================

天啊，我的二抗也是天根的，也没有做出来。
还有哪位战友友用天根的二抗？
本来我很信任天根（质粒小提确实很好）

从这些来分析的话只能说一抗可能降解了
你每次用新的一抗吗？

===============================================================================================================

对啊~我就怕是一抗降解，所以每次都用新的一抗来稀释，没有重复使用过。一抗是GenScript的，今年4月份买的，买来之后就分装成小支-20°C储存的，应该没有这么快就降解吧？
昨天我又将标准蛋白直接滴加在PVDF膜上，想做个杂交试验摸一摸一抗条件，结果曝光过后仍然什么都没有。难道真的是一抗的问题？会不会是封闭过头？我用的是5%脱脂奶粉RT封闭一小时。
另外还有一个问题，我转膜过后膜上的预染Marker上下两头的条带很清晰但是中间的条带有点模糊，这是怎么回事呢？有什么解决方法么？
谢谢！

天啊，我的二抗也是天根的，也没有做出来。
还有哪位战友友用天根的二抗？
本来我很信任天根（质粒小提确实很好）

=====================

二抗一般都没有问题的

对啊~我就怕是一抗降解，所以每次都用新的一抗来稀释，没有重复使用过。一抗是GenScript的，今年4月份买的，买来之后就分装成小支-20°C储存的，应该没有这么快就降解吧？
昨天我又将标准蛋白直接滴加在PVDF膜上，想做个杂交试验摸一摸一抗条件，结果曝光过后仍然什么都没有。难道真的是一抗的问题？会不会是封闭过头？我用的是5%脱脂奶粉RT封闭一小时。
另外还有一个问题，我转膜过后膜上的预染Marker上下两头的条带很清晰但是中间的条带有点模糊，这是怎么回事呢？有什么解决方法么？
谢谢！

==============================

就这么一说我不清楚具体情况是什么