小中大我做Western Blot结果不稳定（有时有条带有时没得，背景时好时坏），现在我在想到底是抗体的原因还是转膜的原因；因为回想这一个月十几次Western Blot，我注意到我恒压转膜对应电流状态好时有180mA，然后掉到150mA（转膜10min的样子），或者是150mA然后120mA，最近150mA然后60或70mA（都是转膜10min左右后的变化）。有次试着用恒流转膜（200mA），对应电压大概180-190V的样子，结果转膜Marker条带非常不清晰，用丽春红染色后只见泳道不见蛋白条带。
现在兄弟很抓狂，不知如何分析改进？
请教了实验室的能人，建议重配转膜液和换转膜的装置；我转膜液前后已配了4，5次，装置也用的是实验室公用的，所以很迷茫。望不吝赐教！
=========================
肯定不是抗体的原因
我喜欢用恒流转膜 300mA
你的整个体系有问题
不是一两句话能说清楚的
