小中大请问你们初次免疫后多久进行加强免疫呢?我看到分子克隆实验指南上说是一个月后,但是我们实验室的好多人都是在一周后就进行加强免疫,检测效价,这样能检测出来吗?
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免疫间隔时间是重要因素,特别是首次与第二次之间更应注意。一个月之后有点长了,但是一个星期之后我觉得又有点短了。我认为应该这样:
第一次免疫后,因动物机体正处于识别抗原和B细胞增殖阶段,如很快接着第二次注入抗原,极易造成免疫抑制。一般以间隔10~20天为好。二次以后每次的间隔一般为7~10天,不能太长,以防刺激变弱,抗体效价不高。
免疫抗原剂量:首次剂量为300~500μg,首次免疫用完全佐剂。加强免疫的剂量约为首次剂量为1/4左右。每隔一段时间加强免疫一次,加强免疫时用不完全佐剂。
免疫方法我想应该用多点免疫,一来因为兔子较大,二来多点免疫的效果好。是在背部多点免疫,免疫了7、8个点。
第一次后测效价肯定不可行,至少要等一个月之后才能测效价,因为免疫后先出现的时IgM,IgM消失后出现的才时IgG。