小中大预备用包涵体免疫小鼠,一共有三个方案:1:包涵体(未溶解)直接免疫2.用尿素溶解后跑胶然后切胶免疫3.将溶解后的包涵体复性再免疫.
问1:这样的方案是否可行.
问2:方案1中:洗涤并离心后的包涵体沉淀.我打算,用PBS先把沉淀充分悬浮,然后也佐剂混合,来免疫小鼠.不知道这样做可不可以?想知道各位老师是怎样做的.
盼复
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回1:可行。我是做过你的方案1和3,没有做过切胶免疫,老板不让。而是做的包涵体直接溶解后没有复性的蛋白去免疫小鼠。
回2:可以。但是要注意量的问题,因为包涵体里面的蛋白浓度是很大的。如果免疫剂量太大的话,可能对动物产生影响,如发热等。但是对于效价有无影响我不知道。