小中大最近要做peg-ALD定点修饰N端了,对于反应条件请教一下各位老师?是不是蛋白与peg的比例越小,定点修饰的几率越大?
谢谢各位了!!
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一般的化,PEG-ALD修饰N末端,PEG:protein大概1:1~3:1,PEG修饰剂需要稍稍过量,这样尽可能使蛋白PEG化,因为毕竟蛋白比修饰剂贵得多.另外定点修饰和PEG比例没有关系,只取决于PEG修饰剂本身和蛋白.
PEG-ALD既可以和N端反应(当然N端必须有NH2,如果你的N端是Pro或其他二级氨,PEG-ALD是不能反应的),也可以与lys反应,通过控制pH值,调节lys与N末端的NH2质子化程度,选择性反应.
当然PEG-丁醛和PEG-ALD由于中间连接linker不同,活性可能有差别