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对于IEF中的两性电解质选择要注意浓度选择(特别注意:Bio-Rad和Amersham的两性电解质缓冲能力不一样,使用浓度也不一样).IPG胶条本身已经具有了固定化的IEF梯度,原则上可以不加两性电解质,但实际上我们在裂解蛋白和IEF的时候还是加了流动相的两性电解质,这个是用来溶解蛋白的,而且在IEF过程中可以让蛋白运动到指定的pH值处并且保持溶解状态不沉淀;但是这个追加的两性电解质有一个缺点就是会导致升压困难,所以,对于两性电解质的浓度选择是,加入的量使IEF能在设定的时间内达到聚焦电压,如果达不到,则减少量,如到达时电流小则可追加量.