蛋白质与蛋白组学 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】蛋白超生破碎产生大量气泡

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 16  2/2 ‹‹12
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【求助】蛋白超生破碎产生大量气泡

wmp1234[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79925
精华 0
积分 588
帖子 855
信誉分 100
可用分 5078
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-17
状态 离线
11

发表于 2014-5-26 13:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我觉得可能是你用的功率太大的缘故。在超声以前最好选一些多余的样品试超，直到不产生气泡。还有就是探头的深浅，最好不要太深或太浅，我一般选的是液面的三分之一左右。
顶部
子衿青青[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 103467
精华 0
积分 212
帖子 164
信誉分 100
可用分 1556
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-1-11
状态 离线
12

发表于 2014-5-26 13:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
从我开似做2D的时候,超声就没有产生过气泡.我用1.5ml的离心管超声过200ul和1500ul的液体,都没有问题.我一般把功率选在150w左右.冰浴.
顶部
子衿青青[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 103467
精华 0
积分 212
帖子 164
信誉分 100
可用分 1556
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-1-11
状态 离线
13

发表于 2014-5-26 13:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

100w
150w
400w
请问各需多长时间？
多谢
顶部
ukonptp[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 103464
精华 5
积分 796
帖子 992
信誉分 110
可用分 5846
专家分 50
阅读权限 255
注册 2013-1-11
状态 离线
14

发表于 2014-5-26 13:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 子衿青青 于 2014-5-26 13:22 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

100w
150w
400w
请问各需多长时间？
多谢

这个需要自己摸条件，缓冲液体系、体积不同，而且菌体密度也不同，超声的参数都有差异。
你可以间隔取样，镜检观察，直到破菌完全
顶部
bring[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 74282
精华 0
积分 597
帖子 914
信誉分 100
可用分 5326
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-9
状态 离线
15

发表于 2014-5-26 13:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

把我的参数告诉你参考一下:
400W 工作时间:3sec 间歇时间:3sec 总共破碎时间:6min
缓冲液体系: PBS
体积:30ml
容器:50ml离心管
PET的是不容易破碎,泡也很难用PMSF消去,我们一般会多破碎一次
注意要在冰浴环境下破碎!
顶部
00无名指00[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76070
精华 0
积分 493
帖子 666
信誉分 100
可用分 4151
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-1
状态 离线
16

发表于 2014-5-26 13:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

时间的问题不好具体说，根据裂解细菌不同及菌液浓度的不同裂解时间也不一样．超声破碎的条件一般是300w，10s/10s，20分钟，具体条件可根据自身情况而定。
顶部
 16  2/2 ‹‹12