【转载】【讨论】transwell肿瘤侵袭实验的吉姆萨（Giemsa）... - 经验共享

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标题:【转载】【讨论】transwell肿瘤侵袭实验的吉姆萨（Giemsa）...

伊莎贝拉[使用道具]
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发表于 2014-8-1 21:24 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 DDD 于 2014-8-1 21:24 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

请问各位，关于染色的方法，能用其他染料嘛？比如伊红，苏木素，抑或是HE？

当然行，建议多看看外文报道的染色方法，适当借鉴一下就是……

ladyhuahua[使用道具]
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发表于 2014-8-1 21:25 资料个人空间短消息加为好友

小中大

楼主，用棉签擦除膜上细胞这一步骤，是将膜剪下来再做的，还是直接用棉签在小室上擦除。
如果不剪下来，会不会擦除不干净？
谢谢。

youreyes[使用道具]
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发表于 2014-8-1 21:25 资料个人空间短消息加为好友

小中大

楼主，用棉签擦除膜上细胞这一步骤，是将膜剪下来再做的，还是直接用棉签在小室上擦除。
如果不剪下来，会不会擦除不干净？
谢谢。

===================================================================

直接擦除。我的步骤是：1.取出小室；2.擦除上室细胞；3.PBS清洗；4.固定；5.染色。
剪下来擦估计会影响下室的细胞，不会擦不干净，我用的是化妆用的棉签。

ladyhuahua[使用道具]
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发表于 2014-8-2 09:29 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 youreyes 于 2014-8-1 21:25 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
楼主，用棉签擦除膜上细胞这一步骤，是将膜剪下来再做的，还是直接用棉签在小室上擦除。
如果不剪下来，会不会擦除不干净？
谢谢。

===================================================================

直接擦除。我的步 ...

我今天擦细胞时发现细胞都被擦到小室的边缘去了，结晶紫染色后形成一圈紫色的环。用力太大有担心把滤膜捅破了。
请问大家擦细胞有什么技巧啊？

紫烟[使用道具]
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发表于 2014-8-2 09:30 资料个人空间短消息加为好友

小中大

紫色一圈应该不是擦过去的，是边缘无法擦去的，但这既不影响统计，又不影响拍照，可以忽略。
我用的是BD的transwell，滤膜还是比较牢靠的，反复使用几次，没有捅破的，小心一点就是。

831226[使用道具]
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发表于 2014-8-2 09:30 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我也染过transwell,感觉这个实验还是相对比较好做的~~ 附图（看到很多人给我发信问怎么染色的，这里补充说明一下，是用伊红染色的，步骤是先用多聚甲醛固定，固定之后再用伊红染色，染完色之后用棉花把上层细胞轻轻擦掉，注意不要把膜弄破，然后放点PBS去照相，注意不要让细胞干燥）