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标题:【讨论帖】细胞培养基本问题

00无名指00[使用道具]
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发表于 2014-12-4 15:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
培养细胞时应使用5 % 或10% CO2？或根本没有影响？
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园丁##[使用道具]
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发表于 2014-12-4 15:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #11 00无名指00 的帖子

一般培养基中大都使用HCO3-/CO32-/H+ 作为pH 的缓冲系统， 而培养基中NaHCO3 的含量将决定细胞培养时应使用的CO2 浓度。当培养基中NaHCO3 含量为每公升3.7 g 时，细胞培养时应使用10 % CO2；当培养基中NaHCO3 为每公升1.5 g 时， 则应使用5 % CO2 培养细胞。
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00无名指00[使用道具]
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 小中大
那何时须更换培养基？
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园丁##[使用道具]
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发表于 2014-12-4 15:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 00无名指00 于 2014-12-4 15:09 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
那何时须更换培养基？

视细胞生长密度而定， 或遵照细胞株基本数据上之更换时间，按时更换培养基即可。 8 培养基中是否须添加抗生素？ 除于特殊筛选系统中外， 一般正常培养状态下， 培养基中不应添加任何抗生素。
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birdfish[使用道具]
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发表于 2014-12-4 15:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
附着性细胞继代时所使用之trypsin-EDTA 浓度？应如何处理？
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发表于 2014-12-4 15:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 birdfish 于 2014-12-4 15:10 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
附着性细胞继代时所使用之trypsin-EDTA 浓度？应如何处理？

一般使用之trypsin-EDTA 浓度为0.05% trypsin-0.53mMEDTA.4 Na。第一次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中， 保存于–20 °C，避免反复冷冻解冻造成trypsin 之活性降低， 并可减少污染之机会。
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dodoit[使用道具]
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发表于 2014-12-4 15:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请问，悬浮性细胞应如何继代处理？
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园丁##[使用道具]
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发表于 2014-12-4 15:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #17 dodoit 的帖子

一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中， 稀释细胞浓度即可， 若培养液太多时， 可将培养角瓶口端稍微抬高， 直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶， 加入新鲜培养基稀释至适当浓度， 重复前述步骤即可。
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ROSE李[使用道具]
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发表于 2014-12-4 15:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？
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园丁##[使用道具]
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发表于 2014-12-4 15:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 ROSE李 于 2014-12-4 15:11 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？  

欲回收动物细胞， 其离心速率一般为300xg (约1,000rpm)，5 - 10 分钟， 过高之转速， 将造成细胞死亡。
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