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标题:[求助]一个很奇怪 很奇怪的现象

toy[使用道具]
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发表于 2012-3-21 14:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]一个很奇怪 很奇怪的现象




最近遇到一个很棘手的问题，我做的实验室MTT测细胞，96孔板，加药是氯仿提取的部位（用0.22um的尼龙滤膜过滤过）。

1.所有铺有细胞，且加有药的孔里，在显微镜下都有网状似的东西，细胞看不清，MTT加后颜色也很深。

2.空培养基中加药却没有网状的东西，但是有一些游动的的点。

都是同时加药的，初步怀疑是染菌，不过也是很郁闷的，过滤都不顶用。希望大家帮帮忙。
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911[使用道具]
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发表于 2012-3-21 15:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #1 toy 的帖子

霉菌污染！！！！！！
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toy[使用道具]
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发表于 2012-3-21 15:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 911 于 2012-3-21 15:02 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
霉菌污染！！！！！！


过滤了还会染？
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toy[使用道具]
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发表于 2012-3-21 15:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

现在又杯具了，原来不染的现在也染了，还是过滤后呢
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skytree[使用道具]
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发表于 2012-3-21 15:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

估计是污染了
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发表于 2012-3-21 15:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

霉菌的菌丝和孢子进入滤液中，过滤是除不掉的，00.22um休想除掉
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toy[使用道具]
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发表于 2012-3-21 15:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

谢谢你！我也觉得像是感染霉菌，可是怎么办呢？太纠结了
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发表于 2012-3-21 15:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

大家好！我又出现了一个新的情况，对于我做的实验我进行了一下检测，发现

1.当药物假如培养基或是具有细胞的培养瓶时，未发现染菌现象

2.当加入孔板中培养有细胞的孔中时，发现有雾一样的一层

3.假如MTT后，未有针状的结晶，只是蓝紫色的雾状

不知是什么情况？是粗提物药物中的成分与MTT反应？还是别的原因，请大家指教
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发表于 2012-3-21 15:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

影响MTT反应的因素有很多的，比如有些药物本身就能影响，一般MTT加入细胞后1－2h就开始有甲瓒晶体出现了，但是有些药物能阻止甲瓒晶体的外排，造成在细胞内生成的甲瓒只能留在细胞内而不外排，显微镜下仔细观察的话成一个一个圆圆的小颗粒（可能就是你上述提到的成蓝紫色的雾状）；如果真这样，那你的实验不适合用MTT来检测。
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toy[使用道具]
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发表于 2012-3-21 15:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

谢谢大家的意见，现在又怀疑是染了黑胶虫，因为在400x下有动的点点，但是有些奇怪，加药后会看到好多点点，不加药就没事，迷茫啊！
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