小中大[讨论帖]实验室菜鸟de每周心得
作为一只刚进实验室的菜鸟每周把自己遇到的东东总结一点发出来,抛砖引玉吧,希望并欢迎刚做细胞de园友来共同学习讨论,也为即将进实验室的朋友些资料,同时欢迎老鸟们指正哈
上周进的实验室,已经一周了,没有师兄、师姐(不是毕业了,就是临床型不做试验的),自己科室的实验室环境和条件都不佳,只好寄人篱下,一切都是自己看,自己问,别个又不大爱搭理咱,哎,相信会有我这种遭遇的人不在少数。。。。
我心得不多,不过我把遇到过了的,估计对他人也有用的一些细枝末节的东西,我都不断发上来(也希望版主看见了,能给我加点分哈,我也好去学习园里其他牛人的帖子哈):
1、在实验室登记领试剂和药品
pbs 1640 Gbico的FBS 台盼蓝 计数板 酒精灯 胶塞 封口胶 消毒的喷剂 记号笔 镊子 标签 饭盒 消毒时包饭盒的布 冻存管 冻存剂 离心管 培养瓶 6孔板 96空板 吸管 吸球
pbs 1640 Gbico的FBS 我都是买的现成的,就是那些实验室老师用原料配好了来卖的那种,我是害怕自己本来就是一个新手,为省那钱自己配,别污染了多的事情都来了,当然很多老鸟都自己配,别鄙视我哈
2、换液
a 开瓶盖的时候,网上的视频里是用镊子开的,但是现在用的瓶塞多是新的,稍微一使劲,胶塞就会被扯破(我这周换了好多塞子了),扯破了的塞子把瓶子包不住,有污染的危险,特别是冰箱里试剂装得很拥挤的时候)
方法:切忌男生像我一样用力过猛,如果实在要扯烂,干脆就用手去扯塞子,不过严格按照翻起塞子-烧-扯-再烧就是了,完全没有污染的顾虑
b 加液体的时候很很容易就吸到赛棉花那一截去了(很多熟练的都不塞棉花了,他们力度控制得好,只要不吸过头,完全ok的),这时候,就不要再吝惜你的培养基了,全部甩到废液缸里去吧,毕竟吸球没有消毒(我们这里是这样的哈),浸湿过了棉花就可能沾到吸球。。。
c 往培养瓶里加pbs、FBS等液体时候,手抖得厉害。。。不是滴在瓶口,瓶壁上,就是滴在超净台上
方法:滴在瓶口的一定要烧干,不然小心污染,瓶壁和台子上的可以用消毒后的干净纱布擦拭;另外就是自己找个空瓶子,自己练习加液体,熟能生巧
3、传代
a 消化细胞的时间真的是不同细胞就不同,我的细胞是消化5分钟,还是在孵箱里放着的,拿出来以后还要又拍又晃的,朋友的一分钟就全飘起来了,
如果你是第一次做,或者你们实验室没有做过这个细胞,您就最好一直在镜下看着细胞,摸一下时间(用表记录时间,不光是“摸”哈),消化过头的细胞,长得不好,如果你是外面买的细胞,就又可能浪费经费了。。。。
另外,认真分析了一下,我的癌细胞稍微比朋友的正常组织的细胞消化得慢,他的细胞长得慢,细胞少(毕竟正常细胞不能和癌细胞比),3天才传第一代,我的都2代的瓶子了都铺满60%,他的贴的也不怎么紧
b 离心
离心的时候,因为忙着把刚终止了消化的细胞拿去离心,很容易忘记在您的离心管上标记,配平完了,机子都转到1000转了,才想起来,也没法子了。
方法:实在是忘记了标记(我。。。),用于配平的管子里的液体没有你刚做完消化的液体清亮,你反正选最清亮的那个就是了,
c 分装的时候,我一传3,加上离心管的盖子,满桌子都是瓶盖,很容易搞错,尤其是在和别个拼台子做实验的时候,更是拥挤,千万要放好,不然空间一拥挤,你取东西的时候很容易从这些面朝上的盖子塞子上面经过,就有可能污染了,虽然盖盖子的时候还要过火烧,但是说实话,烧那几下,连手指都烧不烫,咱还是从不污染的角度做起吧