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标题:[求助]关于脐静脉内皮细胞的原代培养

fsdd817[使用道具]
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[求助]关于脐静脉内皮细胞的原代培养




各位战友,我最近开始养脐静脉内皮细胞,事事不顺,但不知道问题出在哪里,还请大家支招帮忙!现把我原代培养过程给大家说明一下,附图,如下
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fsdd817[使用道具]
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血管充盈的样子,里面是胶原酶


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温箱中消化10-15min,取消化液,感觉难抽极了!


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可能是因为用手挤了一下脐带,有很多类似结缔组织样的东西也和细胞混在一起了


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把倍数放大一下再看看,4h后的


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14h后的,换液了,这算是培养瓶中细胞最多的地方,其它地方稀疏得很.....


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14h后的,换液了,这算是培养瓶中细胞最多的地方,其它地方稀疏得很...... (上面那张是细胞少的图)


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这是28h的,从这时候我开始分不清什么是细胞,什么事杂质或碎片......


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9
 

38h的,从这时候我以为这些亮晶晶的东东是细胞,可是放大倍数,并把视野暗下来,才发现这些东西暗暗的,不规则,以前的那些圆圆的细胞也不见了,这些亮东西还是贴壁的......


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dragonkilly[使用道具]
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1. 取消化液直接松开止血钳就可以了,还要多次冲洗血管内壁呢;
2. 你的消化完全没效果,你获得的细胞可能只是一些血细胞而已;
3. 最重要的地方:你的培养液是错误的,这个培养液不可能培养成功。
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