细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » [求助]Ficoll法分离小鼠全血中的白细胞

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 11  1/2 12››
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:[求助]Ficoll法分离小鼠全血中的白细胞

克隆鱼[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 74060
精华 0
积分 210
帖子 159
信誉分 100
可用分 1546
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-4
状态 离线
1

发表于 2012-3-22 14:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]Ficoll法分离小鼠全血中的白细胞




我想用Ficoll法分离小鼠全血中的白细胞，请问最低需要多少小鼠血可以分离得到白细胞，谢谢！！
顶部
ququer787[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 77499
精华 1
积分 469
帖子 553
信誉分 102
可用分 3661
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-17
状态 离线
2

发表于 2012-3-22 14:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

Ficoll密度梯度离心得到的不是外周血的白细胞，而是外周血单个核细胞，没有多核粒细胞。

取一只小鼠的外周血基本能够取到1ml以上，Ficoll法能够得到些细胞，只是量很少而已。
顶部
克隆鱼[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 74060
精华 0
积分 210
帖子 159
信誉分 100
可用分 1546
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-4
状态 离线
3

发表于 2012-3-22 14:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

嗯，谢谢，第一次做，1ml得到的单个核细胞可以计数吧？
顶部
ending[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76092
精华 0
积分 771
帖子 1242
信誉分 100
可用分 6981
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-1
状态 离线
4

发表于 2012-3-22 14:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你自己试试就知道了，细胞肯定能够拿到了，只是量很少。不知道你用来做什么？
顶部
克隆鱼[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 74060
精华 0
积分 210
帖子 159
信誉分 100
可用分 1546
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-4
状态 离线
5

发表于 2012-3-22 14:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我就是想做个计数，针对不同的免疫条件，比较一下数量的不同，不知道可不可以？谢谢
顶部
wmp1234[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79925
精华 0
积分 588
帖子 855
信誉分 100
可用分 5078
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-17
状态 离线
6

发表于 2012-3-22 14:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
那你是要计数哪些指标。

最好是到医院做血常规，不就什么指标都有了。
顶部
克隆鱼[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 74060
精华 0
积分 210
帖子 159
信誉分 100
可用分 1546
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-4
状态 离线
7

发表于 2012-3-22 14:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

额，我们自己做小鼠试验，主要就是外周血单个细胞的计数啊
顶部
wmp1234[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79925
精华 0
积分 588
帖子 855
信誉分 100
可用分 5078
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-17
状态 离线
8

发表于 2012-3-22 14:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

如果只计数PBMC那绝对没有问题，细胞数肯定够了。
顶部
cj_mondy[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76095
精华 0
积分 627
帖子 853
信誉分 100
可用分 5201
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-1
状态 离线
9

发表于 2012-3-22 14:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你想用Ficoll法分离小鼠全血中的白细胞，然后进行细胞计数，实话说，你的思路已经错了。因为经过Ficoll分离后一定会丢失部分白细胞，具体多少很难说清楚。所以用此方法得到的实验数据肯定不是原始的具体数值。

我建议你用全血细胞计数方法计数器白细胞，然后用血液涂片进白细胞分类（分类计数1000个以上），再根据计数值和分类结果换算成单个核细胞，这样的结果很接近真值。
顶部
dragonkilly[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77754
精华 3
积分 596
帖子 699
信誉分 106
可用分 4371
专家分 30
阅读权限 255
注册 2011-11-21
状态 离线
10

发表于 2012-3-22 14:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你想用Ficoll法分离小鼠全血中的白细胞，然后进行细胞计数，实话说，你的思路已经错了。因为经过Ficoll分离后一定会丢失部分白细胞，具体多少很难说清楚。所以用此方法得到的实验数据肯定不是原始的具体数值。

我建议你用全血细胞计数方法计数器白细胞，然后用血液涂片进白细胞分类（分类计数1000个以上），再根据计数值和分类结果换算成单个核细胞，这样的结果很接近真值。

————————————————————————————————————————————————————————————

这样做的话会不会很麻烦呢？从没有做过这方面的试验。其实我并不想求的特别准确的结果，只是作横向对比的话，也不可以吗？
顶部
 11  1/2 12››