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标题:[讨论帖]流式细胞or Western blot?

newway[使用道具]
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发表于 2012-3-22 15:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[讨论帖]流式细胞or Western blot?



我想用请问各位实验室达人，我想用流式细胞术测定细胞的p21;p27蛋白的表达以及cyclin D,cycinB等，有可行性么？与western blot方法相比哪个简便，成功率高？还有，抗体一般在哪个公司买？我在网上只查到cst有一种
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kuaizige[使用道具]
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发表于 2012-3-22 15:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你所说的这些蛋白常规方法还是用WB，用流式检测理论上是可以的，但是需要这些蛋白的流式抗体，我想目前还没有吧！
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zwsyrt[使用道具]
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发表于 2012-3-22 15:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

流式检测理论上是可以的，但是花钱很多，试剂难买。。。

WB试剂很容易买到，而且基本所有都可以做，
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misswu61[使用道具]
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发表于 2012-3-22 15:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

应该看你的实验目的。

WB是检测某一蛋白的总表达量。但对于细胞膜蛋白，WB不能反映原位表达量，而流式则能。
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plaa[使用道具]
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发表于 2012-3-22 15:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

以上内容在此学习了。各位群友，在检测某基因蛋白表达情况时，除免疫组化外，近几年有没有更先进的或者更好的方法？谢谢各位赐教
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kuaizige[使用道具]
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发表于 2012-3-22 15:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

WB和流式细胞术都可以。
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发表于 2012-3-22 15:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

个人感觉，WB的操作步骤较多，但是能看到各种蛋白及内参的条带，结果更加直观。
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vera+[使用道具]
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发表于 2012-3-22 15:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

流式细胞仪只能检测细胞膜表面蛋白的表达
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BOSS2011[使用道具]
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发表于 2012-3-22 15:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

当然要用WB了，流式只能检测细胞中有没有该蛋白的表达，而WB则能检测这些蛋白的表达量
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junhun[使用道具]
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发表于 2012-3-22 15:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

流式细胞仪可检测胞内甚至核内的蛋白。
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