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标题:[求助]关于MTT的结果分析

wood533[使用道具]
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[求助]关于MTT的结果分析



各位老师,专家:
我是个刚刚接触试验的菜鸟,最近在研究大蒜素对膀胱癌细胞的影响的课题,colony forming assay 显示大蒜素对膀胱癌的colony forming有抑制作用,且成剂量依赖性。
但是当我通过MTT验证大蒜素对肿瘤细胞增殖的抑制作用的时候发现低剂量的大蒜素(我用的colony forming assay里的IC50)却对肿瘤细胞的生长有促进作用,但是随着作用时间的延长细胞增殖又出现了抑制,我反复做了几十次,我的同事也做了几次,都是这样(见图),而高剂量的大蒜素是完全呈时间和剂量依赖性的,不知道,大家有没有遇到过这种情况,或者有什么方便的参考文献,谢谢大家了。


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bamboo16[使用道具]
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和MTT各孔的位置有关系吗?
尝试过加药孔换位置吗?MTT试验周边加蒸发孔了吗?
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伊莎贝拉[使用道具]
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这个我试过了,换了空隙也是这样,我看过一篇以前的文献也是这样的结果,但是他并没有分析是什么原因。
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bamboo16[使用道具]
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如果是这样,那就是事实如此了。
这就象某些物质,低浓度时是香味,高浓度是臭味一个道理。
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kulee[使用道具]
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但是我查了很多其他的文献,在其他的癌细胞上都是完全的时间依赖性的啊,不会像我这个先上升后下降的啊
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xue258[使用道具]
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各位老师,专家:
我是个刚刚接触试验的菜鸟,最近在研究大蒜素对膀胱癌细胞的影响的课题,colony forming assay 显示大蒜素对膀胱癌的colony forming有抑制作用,且成剂量依赖性。
但是当我通过MTT验证大蒜素对肿瘤细胞增殖的抑制作用的时候发现低剂量的大蒜素(我用的colony forming assay里的IC50)却对肿瘤细胞的生长有促进作用,但是随着作用时间的延长细胞增殖又出现了抑制,我反复做了几十次,我的同事也做了几次,都是这样(见图),而高剂量的大蒜素是完全呈时间和剂量依赖性的,不知道,大家有没有遇到过这种情况,或者有什么方便的参考文献,谢谢大家了。

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那啥,你描述的试验过程不是太详细,我根据自己的经验帮助你分析1下,可能不正确,咱们9当讨论,各各抒己见。

首先,药物作用要有1定的量效关系,其次【却对肿瘤细胞的生长有促进作用,但是随着作用时间的延长细胞增殖又出现了抑制】这个结果完全有可能是在药物有效剂量以外,由于培养基的营养成分以及细胞数量造成的。也94说在这个浓度药物根本没有出现有效影响,细胞的先长后抑制是因为后期培养基里营养成分造成的。明白吗?,还是这个条件,细胞数减少到20%再做块板试试。

怎样去证明我的假设?你可以,9做这个药物浓度,对细胞数做倍比变化,看看结果在分析。

有结果鸟,来报1下,俺会继续关注。
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wood533[使用道具]
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那啥,你描述的试验过程不是太详细,我根据自己的经验帮助你分析1下,可能不正确,咱们9当讨论,各各抒己见。

首先,药物作用要有1定的量效关系,其次【却对肿瘤细胞的生长有促进作用,但是随着作用时间的延长细胞增殖又出现了抑制】这个结果完全有可能是在药物有效剂量以外,由于培养基的营养成分以及细胞数量造成的。也94说在这个浓度药物根本没有出现有效影响,细胞的先长后抑制是因为后期培养基里营养成分造成的。明白吗?,还是这个条件,细胞数减少到20%再做块板试试。

怎样去证明我的假设?你可以,9做这个药物浓度,对细胞数做倍比变化,看看结果在分析。

有结果鸟,来报1下,俺会继续关注。

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非常感谢您的帮助,至于细胞的数量我已经试过很多次,从很少的细胞数量,到很多的细胞数量,但都是这样的情况,其实低浓度的大蒜素如果不能抑制细胞的生长也许是还没有到达它的有效剂量,但是我这个结果却是在开始的24小时比不加药的对照组生长的还快,这个是我最疑惑的,而过了24小时时候就又开始抑制了,十分感谢您。
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wood533[使用道具]
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还是希望有高人指点或提供相关的参考文献,谢谢
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ladyhuahua[使用道具]
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这个可能是增值兴奋效应吧,即在低浓度时促进细胞增值,高浓度时抑制,很多物质有这种效应,如镉、砷等
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jkobn[使用道具]
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我最近做了一个药物作用细胞的MTT,结果也是这样,正在纳闷呢,为什么会在低浓度时促进增殖,同样等待高人指点,谢谢
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