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标题:[求助]关于破骨细胞的培养！

薄荷侠[使用道具]
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发表于 2012-3-26 12:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]关于破骨细胞的培养！




我准备进行破骨细胞的培养，出现了几个问题想求教下：
1.GM-CSF有国产的麽？是不是因为提纯度太低，而很少有生产的？
2.破骨细胞的培养一定需要GM-CSF麽？
3.如果有的话请提供一个购买厂商？
谢谢！！！
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mimili_901[使用道具]
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发表于 2012-3-26 12:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #1 薄荷侠 的帖子

哥们，培养破骨细胞一般用的诱导因子是M-CSF，和RANKL，最好是R&D公司的
很贵的，2个加起来要7000左右！
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mimili_901[使用道具]
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发表于 2012-3-26 12:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

还有一种办法就是用成骨分泌的因子支持破骨细胞生长！
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jujuba[使用道具]
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发表于 2012-3-26 12:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

很多文献报道RAW264.7是破骨前体细胞，能不能直接作为破骨细胞用，是否还要诱导使其分化为成熟的破骨细胞？用什么诱导比较省钱？
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guagua[使用道具]
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发表于 2012-3-26 12:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
M-CSF，和RANKL.不能用GM-CSF。
兄弟要养破骨细胞就要准备塌层皮了。我从五月份搞到现在了，才刚有些进展了。
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mimili_901[使用道具]
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发表于 2012-3-26 12:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
很多文献报道RAW264.7是破骨前体细胞，能不能直接作为破骨细胞用，是否还要诱导使其分化为成熟的破骨细胞？用什么诱导比较省钱？

————————————————————————————————————————

同样需要因子诱导，还不如自己从骨髓中提取！
省钱就用成骨细胞分泌的因子诱导，但是得到率太低，还要用共培养的皿，很难买！
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mimili_901[使用道具]
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发表于 2012-3-26 12:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
破骨细胞图片


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zhenxin[使用道具]
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发表于 2012-3-26 12:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我也借这个帖子问一下
我也是最近开始养破骨细胞
我之前看文献上面提到用维生素D3还有地塞米松培养破骨细胞
那用大鼠骨髓细胞诱导成破骨细胞的话VItD3和地塞米松一般是用什么类型的？
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发表于 2012-3-26 12:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我党原代培养步骤是
（1）处死大鼠，75%乙醇浸没2-5min；取四肢置于PBS缓冲液中。
（2）用眼科剪和眼科镊分离出胫骨，股骨，肱骨，尺骨和桡骨，尽量去除骨周软组织后置于冷分离液中。每只用0.5-1ml分离液。
（3）于分离液中用手术刀将骨剖开，轻刮骨髓腔,用枪反复吹打2min，使贴附在骨基质上破骨细胞脱落下来。静置15-30s。接种于培养皿.2小时后将未贴壁的细胞洗去.
结果没发现有破骨细胞,请指教!谢谢!
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发表于 2012-3-26 12:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我养的破骨细胞，VD3诱导成的，TRAP染色。
感觉有一些多核细胞，应该没错。
大家养破骨细胞的时候放骨磨片吗？ 证明一下具有噬骨能力，就更好了。只是弄不到骨磨片。
希望与各位交流。


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