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标题:[求助](多图)T98G胶质瘤细胞培养异常,请指点。

minran_1980[使用道具]
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[求助](多图)T98G胶质瘤细胞培养异常,请指点。



本人初学细胞培养,刚开始时状态很好,传过七八次后出现细胞内颗粒状物质,细胞外也有。细胞生长变慢。使用环丙沙星无明显改善。排除了培养瓶,培养液和滴管的污染。重新复苏后仍然是这样。十分苦恼,请高手们指点一二。


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minran_1980[使用道具]
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再传一张清楚点的。


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再附上两张今天刚拍的清晰照。


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minran_1980[使用道具]
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红箭头示细胞内颗粒,蓝箭头示细胞外和细胞周围的颗粒。
请教大师们,这些颗粒是细胞死亡后的碎片还是有细菌污染啊?


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duoduo[使用道具]
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可以肯定不是真菌污染,也不是普通的细菌污染,你这颗粒会随着培养逐渐增多吗?复苏了几次都是这样?我感觉你这所谓细胞内颗粒和胞外颗粒可能不是同一个东西,胞内刚复苏也是如此?
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我的悬浮细胞也出现了这个状态,支原体检测没问题,同事讲CHO细胞就是这样,但我还是有点怀疑,感觉细胞就是有问题,但不知道什么问题
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fklo83[使用道具]
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可以肯定不是真菌污染,也不是普通的细菌污染,你这颗粒会随着培养逐渐增多吗?复苏了几次都是这样?我感觉你这所谓细胞内颗粒和胞外颗粒可能不是同一个东西,胞内刚复苏也是如此?

++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++

第一匹复苏的细胞状态很好,没有这样的颗粒,代了有七八次以后突然出现这样的颗粒,而且细胞生长变慢了,以前1:4传代,两天就长满了,现在三四天才长满。我怀疑有细菌污染,就扔掉不用了。
第二匹复苏的细胞一开始就有这样的颗粒,两天也长不满。于是又扔掉再复苏。
第三匹细胞和第二匹一样,在老师的建议下使用环丙沙星,经过几天,并没有明显改善。
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fklo83[使用道具]
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我看着感觉你的细胞状态是不错的,贴壁伸展地比较开,细胞也比较丰满。
不知道你的细胞的增殖得如何,是否是指数生长的?
你的那些颗粒是不是这种胶质瘤本身就会产生和分泌呢,属于正常现象?

+++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++

没出现这些颗粒之前,增殖是很快的,出现这种情况后增殖明显变慢了,以前两天一传,现在要三四天才长满的。
感觉不是正常现象。因为最初一段时间的培养中并没有这些颗粒状物质。别人以前培养过程中也没发现这些现象。
郁闷的是排除了一些可能污染的因素以后,以及使用了抗生素以后还是没有改善。接连复苏同一匹冻存的细胞两次都是一样的现象。
复苏的细胞都是来自于另一同学,他最近也复苏了一管细胞,传代以后向他要了一瓶,发现他的细胞也有类似的问题。
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summerxx[使用道具]
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顶一下,希望能够得到解决,我发现的是好像这个还会空气传播,同一培养箱的细胞都会出现这个样子
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