小中大不知道您是怎么换液的，如果是将24孔板培养基全部吸掉再加培养基，则有可能有些孔由于时间太长细胞发生干瘪，在光镜下显示为贴壁，缩小，变平。不知道是不是你说的那种现象？没有图只能靠瞎猜。。。。
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多谢你的回复。
你描述的细胞状态很对！
你说的这种情况我也考虑到过，我前两天曾经也拿了一块铺板过密打算不要的板，然后分了三组：1、培养液吸光，等五分钟再加入原培养液 2、培养液吸光，等十分钟再加入原培养液 3培养液吸光，等五分钟再加入新培养液（完全没有以前培养液中细胞自分泌或者旁分泌的支持因子）
结果都是好的，没有发生。不过我也认为你说的可能还是不能完全排除，因为本次实验是密度已经基本上90%，大概密度高的细胞还好。而且之前出现这种情况的时候我一般都有用PBS或者DMEM洗涤的经历。
不管怎么说你描述的状态很对。
