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标题:[求助]药物析出到底该如何解决

小糖块[使用道具]
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发表于 2012-4-3 16:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]药物析出到底该如何解决




大家好：
请求大家的帮助！
我做细胞试验，抗肿瘤药物活性筛选。现在用到的一种药物，先用DMSO配制成100mm的母液后，实验时用培养基稀释（无论是稀释1000倍还是3000倍），该药就析出（析出后成白色蜡状，肉眼看到）。然后超声，加热等处理仍然不能溶解。
看到有些帖子说加吐温-80？不知道对不对？如果可以的话，具体应该如何操作？
或者有没有解决的办法？
谢谢大家。
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eric930[使用道具]
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发表于 2012-4-3 16:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

药物稀释后有结晶析出是由于药物不溶于水因此在培养基中析出，因此要先用DMSO稀释，再用培养基稀释。注意DMSO的终浓度要小于千分之一，否则对细胞有毒性作用。
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发表于 2012-4-3 16:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

用DMSO做dilution，直接加到细胞中，一般1ul加到100ul的细胞中。1％DMSO一般的细胞都可以承受，当然需要做对照。
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发表于 2012-4-3 16:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我是先用DMSO配制的储备液，然后用培养基稀释1000倍得到最大浓度，然后再依次用培养基稀释。问题是药物要析出。
楼上两位的看了不太明白，是在告诉我按照您说的解决吗 ？但是我看不太明白，具体要如何操作？
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发表于 2012-4-3 16:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

还有，如果用无水乙醇溶解做成储备液的话。我的这种药物只溶于热乙醇，乙醇的挥发性对药物浓度的影响如何考虑
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发表于 2012-4-3 16:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

就是不要用培养基稀释，用DMSO稀释到你要的浓度进行实验。
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发表于 2012-4-3 16:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这种情况遇到过，也就是跟楼上几位说的方法一样
药物在水里溶解度低并不是说完全不溶，好在细胞培养用的药物浓度一般在μmol级，这就可以用DMSO直接将药物稀释到你需要的浓度，再按小于千分之一的终浓度加入就可以了。如吸取1μL药液加入2mL的培养液中，一般是没什么问题的。
当然，为了实验的精确，只加DMSO的对照是很有必要的。
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发表于 2012-4-3 16:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
就是不要用培养基稀释，用DMSO稀释到你要的浓度进行实验。

例如，我用的是50um/l的药物溶液，然后我取1ul已经配好的100mm的母液（DMSO配制），再用DMSO稀释2000倍，得到50um/l的工作溶液，然后再直接加入到接种6孔板的细胞液中去吗 ？好像不对啊?药物浓度不是变了吗
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发表于 2012-4-3 16:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
就是不要用培养基稀释，用DMSO稀释到你要的浓度进行实验。

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我用DMSO配制成我需要的浓度之后，然后还不是要把他加入到培养细胞的培养基中去吗？能不能第二句话再具体点，举个例子啊？
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小糖块[使用道具]
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发表于 2012-4-3 16:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这种情况遇到过，也就是跟楼上几位说的方法一样
药物在水里溶解度低并不是说完全不溶，好在细胞培养用的药物浓度一般在μmol级，这就可以用DMSO直接将药物稀释到你需要的浓度，再按小于千分之一的终浓度加入就可以了。如吸取1μL药液加入2mL的培养液中，一般是没什么问题的。
当然，为了实验的精确，只加DMSO的对照是很有必要的。

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您说的“吸取1ul药液加入到2ml的培养基中”，这1ul的药液的浓度不是我要用的最终浓度吧？我试过用1ul 100mm的母液（DMSO稀释）直接加入到2999ul的培养基中，还是要析出。难道是让我直接用DMSO配制成我所要用的浓度，然后“再按小于千分之一的终浓度加入就可以了”那就是说还得用培养基稀释吧
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