小中大我一般都是站在旁边看着的，溶有了一部分之后颠倒摇匀以加速溶。只要能把冻存液全部溶解即可。我一般都是1ML冻存的，所以复苏的时间一般也在1分钟左右。
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后面的步骤一般有三种做法：
1.溶解了之后1000转离心5分钟，去除上清之后再用完全培养基将细胞重旋，最后就转到细胞培养瓶汇中。但是转速一点不能太高以免破坏细胞，因为此刻的细胞是很脆弱的。根据细胞的不一致转速要有所不同。
2.一般我是用的冻存液是含10%DMSO，我又是1ML冻存，所以就在溶解之后转移到细胞培养瓶中，同时加进9ML完全培养基，以把DMSO降到对细胞最小影响。
3.直接将溶解之后细胞转移到细胞培养瓶，根据细胞培养瓶的大小往里加入完全培养基即可。
前面两种做法都将DMSO的危害降到最低，第三种做法则没有，但是有些细胞来说也没有影响。我现在一般都是采用第二种做法。
