小中大正常的全血离心后上面是黄色的，红细胞应该在底层
你这个图很明显溶血了，溶血标本是做不出来的。
加血液到分层液里面的时候一定要注意，要慢慢的让血液顺管壁流下去，千万不要把界面弄混了，搁进去离心的时候也要轻轻的保持界面清晰。当然随着时间的延长可以看见红细胞会慢慢向试管底部沉降(很漂亮哦），这是正常的。
这是我的步骤：
1、无菌采集静脉血2ml注入盛有2ml Hank’s液（含100u/ml肝素）的试管中，混匀。
2、吸取淋巴细胞分层液2ml加入离心管中，再将稀释抗凝血液小心沿管壁加至分层液上，应注意保持两者界面清晰。（关键）
3、室温2000r／min离心20min。管内可分为四层。
4、将上层淡黄色的稀释血浆取出于洁净试管中-20℃保存。
5、用毛细吸管轻轻吸出乳白色的单个核细胞，加入另一支已含有2~5mlHank’s液的离心管中，混匀。
6、室温下,1500rpm离心10min。
7、弃上清，重复洗涤一次。用完全RPMI-1640 1ml定容，计数细胞，调整细胞悬液至所需浓度：一般每ml血可分离出1~2×106个单个核细胞。
