[求助]MTT结果相反？

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标题:[求助]MTT结果相反？

minran_1980[使用道具]
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发表于 2012-4-7 09:00 资料个人空间短消息加为好友

小中大

预实验MTT结果相反！不知道为什么？万望各位前辈不吝赐教！***！！！

加MTT后4小时：

附件

2012-4-7 09:00

20400769.snap.jpg (40.47 KB)

minran_1980[使用道具]
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发表于 2012-4-7 09:00 资料个人空间短消息加为好友

小中大

去除上清后，加100微升/孔DMSO振荡后：

附件

2012-4-7 09:00

62027816.snap.jpg (51.33 KB)

minran_1980[使用道具]
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发表于 2012-4-7 09:00 资料个人空间短消息加为好友

小中大

MTT结果：

附件

2012-4-7 09:00

84415380.snap.jpg (29.36 KB)

minran_1980[使用道具]
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发表于 2012-4-7 09:01 资料个人空间短消息加为好友

小中大

1、用492nm测定
2、用新版
3、2峰药物为2、3、4、5四竖排（B至G），且药物浓度由上至下变小（浓度对倍稀释），G2、G3、G4、G5为对照孔。6竖排为药物和培养液孔，药物浓度由上至下变小（浓度对倍稀释）。
4、3峰药物为8、9、10、11四竖排（B至G），且药物浓度由上至下变小（浓度对倍稀释），G8、G9、G10、G11为对照孔。12竖排为药物和培养液孔，药物浓度由上至下变小（浓度对倍稀释）。
5、在显微镜下可见呈一定的趋势的。

为什么结果会是这样呢？？在此***了！

ffooll[使用道具]
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发表于 2012-4-7 09:01 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我的理解，你的G2、G3.....不是对照孔，对照孔应该是H2、H3.....，不知对否？不过总体上说，你对照孔的值太低了，是不是细胞数加少了？
你的结果平行性尚可，结果相反是否可能与你加样时顺序弄反了、因细胞数太少引起结果不可靠、药液本身的颜色引起的？

建议重做一次。如果结果还是这样，那也许就有重大发现了：你的药液有促细胞生长的功能!!

minran_1980[使用道具]
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发表于 2012-4-7 09:02 资料个人空间短消息加为好友

小中大

首先，对ffooll的热心表示感谢！

其次，“对照孔应该是H2、H3.....” ,是这样的。

再者，加样时顺序没有错的，细胞也无污染。只是见前几个药物浓度高的孔有较多的细胞碎片。细胞也不是很少。

最后，6竖排、12竖排为药物和培养液孔，从结果可见，其并无影响啊！我的药物并无促细胞生长的功能，而是使细胞死掉。

如何办呢？？？郁闷！

ffooll[使用道具]
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发表于 2012-4-7 09:02 资料个人空间短消息加为好友

小中大

H2、H3....的数值太低，说明每孔铺的细胞太少，而你说“前几个药物浓度高的孔有较多的细胞碎片。细胞也不是很少”，令人难以理解，不加药物的对照孔就那么点细胞，加入药物后细胞竞然也不见少!
因此，请查一下是否你的MTT出了问题？配制了多少时间？
不妨铺一块细胞浓度梯度板，待细胞贴壁后，用MTT法检测，看OD值与细胞数间有没有线性关系。

ffooll[使用道具]
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发表于 2012-4-7 09:02 资料个人空间短消息加为好友

小中大

你的问题关键在于对照孔的值过低! 我在8月30日建议你“不妨铺一块细胞浓度梯度板，待细胞贴壁后，用MTT法检测，看OD值与细胞数间有没有线性关系”，不知你尝试了没有？

bananapeople[使用道具]
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发表于 2012-4-7 09:03 资料个人空间短消息加为好友

小中大

请问为什么有的文献中用570nm检测mtt波长，而有的文献就用492nm呢，请各位赐教。

vera+[使用道具]
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发表于 2012-4-7 09:03 资料个人空间短消息加为好友

小中大

你好！
mtt结果应该如何分析？想请教你.

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