细胞世界

当我们进行肿瘤细胞侵袭试验的时候，常常要把细胞种在上腔，下腔中则加入血清或者一些相应的趋化因子，同时，在通透膜上腔面包被上基质胶（Matrigel胶）模拟细胞外基质。这样，肿瘤细胞受到下腔物质趋化而向下运动，必须先分泌基质金属蛋白酶（MMPs)来降解Matrigel胶，然后透过通透膜，进入下腔。

当肿瘤细胞分泌的MMPs,Matrigel胶的浓度和厚度，下腔的趋化因子强度达到一种适合的关系的时候，借助于transwell的侵袭试验是便于操作和评价的。

换言之，如果Matrigel胶浓度太大或者涂得太厚，则不容易评价肿瘤细胞的侵袭作用。因此，一般要对Matrigel胶做一定比例的稀释，具体浓度应当考虑您所用的肿瘤细胞分泌的MMPs的情况和下腔设置的趋化因子的情况后确定。

水化滤膜（通透膜）应当在种细胞前进行。

正如版主所说，一般不认为transwell的滤膜会限制蛋白运动。如果是为了进行共培养，多选用0.4微米孔径，这样分泌的蛋白可以透过，而细胞不会漏下去。至于细胞直径，目前还没有报道有真核生物的完整细胞小于1微米。

请教transwell通透膜种类选择的问题。
我用于细胞共培养，检测细胞因子对下层细胞的影响，我选择了0.4um的膜。因为上层细胞是造血细胞（悬浮），似乎对细胞的粘附要求不高。请问这种情况膜材料的选择是PET,还是PC更好一些？如果是贴壁的细胞，情况又是如何呢？感谢解惑！

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聚酯(PET)Transwell-的特点是其滤膜在显微镜下呈透明状态，这样细胞在相差显微镜下更易观察，可以估计细胞的生长状态。
而聚碳酯(PC)Transwell的膜则呈半透明状态，不容易在镜下观察细胞。

如果是用于共培养目的，您选0.4微米孔径是恰当的，至于选PET还是PC，还是要根据您的实验目的来定。

如果您在上层种上贴壁细胞，也是可以的。个人曾经这样干过，上层和下层都种了贴壁细胞，我的实验目的希望能够同时观察两种细胞的生长情况，就选用了透明的PET膜。观察细胞的时候可以调节显微镜的焦距分别观察上层和下层的细胞状态。