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标题:[求助]HUVEC细胞“杯具”重演

Ao7[使用道具]
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发表于 2012-4-12 10:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]HUVEC细胞“杯具”重演



这学期真不顺，开始复苏自己冻存的HUVEC细胞株，发现长到70%左右还挺好的，过了一晚后，细胞已经变成碎片了，变成小小的颗粒，漂浮的也很多，贴壁的已经看不到几个完整的细胞了。复苏了好几批都是这样的，不知道原因为何？昨天从另一个校区要了一瓶过来，拿来的时候状态还可以的。今天早上“杯具”重演，都是碎片，到底是为什么？？
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loli[使用道具]
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发表于 2012-4-12 10:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

关注一下。我也是复苏huvec硬是没有复苏成功过。我的是板上有黑点，不知道是什么东西，又不动的。
等你的复苏结果。
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kswl870[使用道具]
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发表于 2012-4-12 10:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
复苏时间是不是太长了，应该尽快在37度的水里速溶。
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发表于 2012-4-12 10:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
复苏时间是不是太长了，应该尽快在37度的水里速溶。
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ffooll[使用道具]
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发表于 2012-4-12 10:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这株细胞复苏的时候容易这样，有一个原因是冻存之前受到了黑胶虫的污染，只是不明显而已，但是黑胶虫在细胞状态不好的时候，也就是刚复苏的时候细胞细胞处于“抵抗力”薄弱的时候，非常容易引起黑胶虫的大量繁殖，以致细胞状态非常差后死亡。不知道我说的有没有帮助，还有一个原因可能是配得液体时间过长，谷氨酰胺消耗没了，但这个原因不是很明显。
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baidukk[使用道具]
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发表于 2012-4-12 11:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

HUVEC细胞（即人脐静脉内皮细胞）是正常细胞，非永生细胞系，所以会随着代数的增多状态越来越不好，出现崩解。最好买较早批次。25带以内。
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zsxan1990[使用道具]
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发表于 2012-4-12 11:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

哎，我复苏的一株癌细胞系也出现类似情况...培养液颜色正常，也未发现细菌，真菌污染的情况，只是细胞培养皿板底不太干净（其实还好），长至70%左右就开始漂...原因未明...郁闷，去年养得还好好的...
我准备接下来再试一次，使用进口血清，并适当增加血清浓度；细胞复苏贴壁成功后，换液适当变勤一点；细胞融合到一定程度传代一次，不给它漂起来的机会...
希望能够养起来...
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kuaizige[使用道具]
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发表于 2012-4-12 11:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这学期真不顺，开始复苏自己冻存的HUVEC细胞株，发现长到70%左右还挺好的，过了一晚后，细胞已经变成碎片了，变成小小的颗粒，漂浮的也很多，贴壁的已经看不到几个完整的细胞了。复苏了好几批都是这样的，不知道原因为何？昨天从另一个校区要了一瓶过来，拿来的时候状态还可以的。今天早上“杯具”重演，都是碎片，到底是为什么？？

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最好拿到细胞之后进行冻存；越早冻存越好~~以降低该细胞的传代次数；
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发表于 2012-4-12 11:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

同志们的HUVEC有种质鉴定么，是自己提取的么，还是买的？
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fei1226com[使用道具]
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发表于 2012-4-12 11:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们的细胞也是这样，这是怎么回事啊？快急死了
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