小中大[求助]肝癌原代细胞培养的一些问题
最近在养肝癌原代细胞~~~但是就是养不活，也不知道哪里出了问题
求助于大家，看看哪有问题。因为是新手，所以还有好多不懂得，有什么不对的大家多多指教，在此谢过了先~~~
取材：肝癌组织为手术切下的新鲜组织，低温转运到实验室，大约20分钟。
清洗，消化：PBS清洗2次，眼科剪剪成小块，胰酶（买的配好的）37℃消化30-40分钟。
过滤：200目细胞筛过滤，出去未消化的组织块。
离心：离心1000r/min，5分钟，离心3次。
种板：加20%培养基,种六孔板。（1640培养基，血清是国产的）
大概步骤就这么多吧，可能写的不是很仔细，但是步骤和一般的原代培养应该一样。呵呵
要说一下是，本人没有给细胞计数，因为这次的细胞比较少。
然后呢，就是照片。大家看看发表一下意见。不胜感激。
