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标题:[求助]细胞被污染能支持多久？

woshituzhu[使用道具]
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发表于 2012-4-13 12:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]细胞被污染能支持多久？



我养的L-02肝细胞，昨天传代，今天发现全部被白色念珠菌感染，我个人刚好感冒，有关系吗？？然后想用两大霉素至治疗，但没有现货，得等3到4天，我的细胞每天换液和用PBS冲洗，能支持3天吗？？
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rxcc33[使用道具]
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发表于 2012-4-13 12:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

感冒是病毒感染，白念是真菌，不是一回事啦！
庆大霉素对白念没啥效果，甭指望那个
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vcve[使用道具]
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发表于 2012-4-13 12:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
先频繁洗吧，然后加入两性霉素B， 2.5ug/ml，起始可以加稍高浓度；

如果有冻存的细胞种子，还是把这株细胞丢掉吧，因为即使用了药，也很难保证杀干净的。
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woshituzhu[使用道具]
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发表于 2012-4-13 12:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
冻存的种子不多，所以不舍得丢弃。最近不知道为什么，养着养着就自己污染了，传完代后头两天都没有事，第三天就浑浊了，什么都没有动过，超级崩溃！
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vcve[使用道具]
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发表于 2012-4-13 12:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
第三天污染的是真菌啊 用药是没有作用的 建议把培液验下菌 看看三天会不会污染 然后在养
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vcve[使用道具]
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发表于 2012-4-13 12:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
冻存的种子不多，所以不舍得丢弃。最近不知道为什么，养着养着就自己污染了，传完代后头两天都没有事，第三天就浑浊了，什么都没有动过，超级崩溃！

——————————————————————————————————————————

这个问题只能希望你注意无菌观念了，我用培养皿养细胞，连续养1个多月都很少污染的。
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is2011[使用道具]
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发表于 2012-4-13 12:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这个问题我以前也遇到过,如果真是被白色念珠菌污染,我想是没有什么方法能有效清除了,我以前几乎把市面上所有的能用的认为好的抗生素都用了(包括一种进口的超级抗生素)也没保住被污染的细胞,每天用PBS冲洗,早晚各一次,人也受罪,细胞也受罪,前后折腾了近2个月还是不行,建议楼主还是不要浪费时间了,重新换新的细胞或细胞室进行彻底消毒.
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woshituzhu[使用道具]
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发表于 2012-4-13 12:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

细胞室消毒，除了新洁尔灭和紫外消毒外，谁试过甲醛熏蒸，改怎么操作，会把培养箱里的细胞熏死吗？？
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okhaha[使用道具]
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发表于 2012-4-13 12:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
甲醛熏蒸的时候,所有细胞培养箱最好停用,把细胞都转移到别的实验室去养,转帖步骤如下
①按照甲醛（40%）10毫升／立方米、高锰酸钾5克／立方米计算用量。不同情况下，用量有所不同，但比例为2：1。

②盛药容器要大、耐热、耐腐蚀：一般用陶瓷或玻璃容器，因为高锰酸钾和甲醛都具有腐蚀性，且混合后反应剧烈，释放热量。

③房间要密闭：这样熏蒸效果才会好。

④容器应尽量靠近门，以便操作人员迅速撤离；先将温水倒入容器内，后加入高锰酸钾，搅拌均匀；再加入甲醛；加入甲醛后人立即离开，密闭房间。
注意顺序：是将甲醛倒入高锰酸钾溶液内。

⑤消毒时间一般为20-30分钟。

⑥消毒后要打开门窗通风换气。

这里说的甲醛就是40%的甲醛溶液，也就是福尔马林，一般包装上写的是37%。
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okhaha[使用道具]
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发表于 2012-4-13 12:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
消毒后可放入25%氨水蒸发中和刺激气味。氨水用量为所用甲醛水溶液的一半，时间为30分钟。甲醛气体毒性非常强，所以操作时一定需带上防毒面具
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