细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » [求助]破骨细胞培养

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:[求助]破骨细胞培养

ffooll[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 73418
精华 0
积分 437
帖子 574
信誉分 100
可用分 3666
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-22
状态 离线
1

发表于 2012-4-13 15:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]破骨细胞培养




各位群友，我们课题组准备用RANKL,M-CSF对破骨细胞进行体外培养，现在老板让我定RANKL和M-CSF这两种破骨细胞诱导剂，但看了好多文献还不太清楚具体哪个公司有这两个因子，问代理试剂的，他们更是一团雾水。只有上丁香园上求助战友，不知道哪位能提供信息，最好能提供相关公司的货号。请做过破骨细胞的战友帮忙！谢谢~~

在丁香通上看M-CSF咋个有的又是抗体有的又是elisa试剂盒，真不知道哪个才是我要的~~
顶部
66小飞侠[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75376
精华 0
积分 466
帖子 651
信誉分 100
可用分 4008
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-22
状态 离线
2

发表于 2012-4-13 15:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我做的就是　破骨细胞体外培养的实验。
你们老板，一定钱很多吧。　
我们实验室的　M-CSF是　购自　R&D的。比较贵，但是效果非常好。
一只老鼠的骨髓细胞，经过３天体外培养（M-CSF only 30ng/ml）.
能得到　１０００００００个　BMM 细胞。

RNAKL + M-CSF　的对象是，在体外培养出来的BMM细胞。
我们实验室的RANKL 是自己提出来的。
效果比一般的公司买的都好。

还有，我们这方面　最牛的人　名字叫　Takayanagi H.
我们这方面，要说，还是日本走在最前沿。
很多好论文，都是出自日本东京大学。
多看看他们的论文，他们用什么，你就跟着用什么。
只要能　炸出更好的点子，，，在破骨细胞领域出好论文，还是有希望的。
毕竟，破骨细胞领域还属于，新兴领域，，不成功，则成仁，呵呵。

祝好！！
顶部
66小飞侠[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75376
精华 0
积分 466
帖子 651
信誉分 100
可用分 4008
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-22
状态 离线
3

发表于 2012-4-13 15:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

R&D system
--- Recombinant Human M-CSF

Catalog No: 216-MC

由于，订货以后，那边才能合成，所以，货号每次都不一样。
价钱大概是 0.5mg = 2~3万人民币？？？
由于是进口，每次都不太一样，每次打的折扣也都不一样。。
顶部
ffooll[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 73418
精华 0
积分 437
帖子 574
信誉分 100
可用分 3666
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-22
状态 离线
4

发表于 2012-4-13 15:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
Recombinant Mouse M-CSF
Catalog No: 416-ML

还有您说RNAKL是自己提出来的？不知道步骤复杂不复杂？如果太复杂，觉得还是买现成的试剂。
顶部
66小飞侠[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75376
精华 0
积分 466
帖子 651
信誉分 100
可用分 4008
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-22
状态 离线
5

发表于 2012-4-13 15:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

RANKL 买的话，也是比较贵。。

不过，提纯一次，要前后 1周的时间。呵呵。

还有，购买之前，跟 R&D的 国内代理商好好问一问，，

我们一直做的都是小鼠实验，不好说阿。呵呵
顶部
baidukk[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77444
精华 0
积分 803
帖子 1226
信誉分 100
可用分 7048
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-17
状态 离线
6

发表于 2012-4-13 15:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

也可以用其他的替代呀，我去年也养了破骨细胞。
用RAW264.7与小鼠成骨细胞共同培养，用破骨诱导液诱导，大概6-7左右，就能出来。

破骨诱导液配置：
10%胎牛血清DMEM培养基中加入Dex和1, 25 (OH) 2VitD3 ,使两者浓度分别为10- 7mol/L和10- 8mol/L。
顶部
66小飞侠[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75376
精华 0
积分 466
帖子 651
信誉分 100
可用分 4008
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-22
状态 离线
7

发表于 2012-4-13 15:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

但是，级别等级高的论文中，基本的培养体系都是 M-CSF & RANKL.

诱导液，不是不行~~

应该说，跟着大势走吧，，呵呵
顶部
49888[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77494
精华 0
积分 776
帖子 1211
信誉分 100
可用分 6906
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-17
状态 离线
8

发表于 2012-4-13 15:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
Rankl, sigma 公司有的，还有个Ｐeprotech公司有
顶部