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标题:[求助]肿瘤细胞复苏后的样子，类似脂滴，又似凋亡

bamboo16[使用道具]
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发表于 2012-4-13 15:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]肿瘤细胞复苏后的样子，类似脂滴，又似凋亡



最近复苏了一上皮肿瘤细胞系，原细胞冻存条件为在-80℃下3个月，复苏后细胞2天相差显微镜下观察如附图，其中图1、图2中箭头所示细胞内类似脂滴状的表现，也不知道是不是细胞刚复苏的缘故，细胞内容易产生空泡，甚是费解，遂来请教园里战友！
附图：


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发表于 2012-4-13 15:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

附图2


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发表于 2012-4-13 15:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
补充培养基情况：K-SFM培养基（含10%FBS，重组人表皮生长因子10ng/ml），Gibco公司。
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发表于 2012-4-13 15:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请问楼主养的是什么肿瘤细胞？我养的子宫内膜癌HEC-1B也经常出现这种情况，有人说是支原体污染，后来向细胞库重新要了一支，可没过多久又出现了这种情况，特别是传了3-4代之后就出现了
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bamboo16[使用道具]
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发表于 2012-4-13 15:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请问楼主养的是什么肿瘤细胞？我养的子宫内膜癌HEC-1B也经常出现这种情况，有人说是支原体污染，后来向细胞库重新要了一支，可没过多久又出现了这种情况，特别是传了3-4代之后就出现了

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口腔鳞癌细胞，我的是复苏后出现的，传代后未见类似情况。
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发表于 2012-4-13 15:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

感觉是存放时间太久，细胞活力降低。细胞最好还是保存在液氮里面啊
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发表于 2012-4-13 15:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

DMSO质量较差，还有种情况是复苏时间过长
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bamboo16[使用道具]
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发表于 2012-4-13 15:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
DMSO质量较差，还有种情况是复苏时间过长

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请问“DMSO质量较差，还有种情况是复苏时间过长”具体怎么解释？
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发表于 2012-4-13 15:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
DMSO质量差主要表现在纯度不够，你比较一下SIGMA的和国产一些小厂的，冻存细胞的效果是不一样的。
我们知道，细胞的复苏的时间越短越好，其实和冻存的时候正好是反着来的，冻存使得DMSO慢慢渗透，内外达到一个平衡状态，细胞不会死掉，此时的温度很关键，DMSO在此时基本上可认为无毒或者对细胞的毒性很小，但是复苏的时候如果还是这样，细胞膜在37°的水温中DMSO的毒性会显现，对细胞的损伤较大，你这种情况我个人感觉不外乎是这两种情况。
个人经验，仅供参考！
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发表于 2012-4-13 15:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
冻存和复苏效果不好。
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