细胞世界

组织块法看似简单，实际上却是最难掌握的。如果不能掌握组织块法，就不能说掌握了原代培养。介绍两个比较好掌握的方法：
1、用锐利刀剪，将组织块剪到米粒大小，放置在6孔板内，一孔内5-6个组织块，加入少量液体，以组织块不漂起为宜，每天换液，连续3天，换液量仍然以液面高度低于组织块高度、组织块不漂起为准。
2、上述方法的改进：在组织块上再压上一个盖玻片，以保证组织不移动。其它同上。

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您好，觉得听了您的方法之后恍然大悟，那以您做原代培养的经验来说，很少量的组织也就是手头有限的组织，用什么方法获得的活细胞率会高一点啊？我的组织很少很有限，觉得用机械剪切法做不是很可行，故没用，做的时候用的消化法，可是做了几次之后发现，基本得不到我想要的细胞，也就是基本没有活细胞的样子，那按照这种情况的话，您建议用什么方法好呢？用您说的这种植块法成功率有多少呢？因为我的组织有限嘿嘿，谢谢老师指点

组织有限，只能用组织块法。只有组织块法才能保证比较高的成功率。
你是要养啥细胞？

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呵呵，我要养内皮细胞，英文看文献上用的是消化法，所以刚开始一直在尝试用消化法，但是没有成功，现在才想这尝试一下组组织块法，织块法需要包被6孔板或者是培养皿、培养瓶之类的吗？谢谢了

是用脐带吗？
内皮细胞还是得消化法。组织块法养内皮细胞很难避免杂细胞污染，最好还是消化法。

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不是用脐带，用淋巴管瘤培养淋巴管内皮细胞！我用消化法做的也是非常多的杂质，并且我觉得几乎看不到活细胞呢？组织块也看着变小了，也看着松散啦？怎么会这样呢？我还需要注意什么呢？谢谢老师指点

嗯，不贴1般3个主要原因【其他意外不详述】。

1.组织块外表层细胞因为消化时间过长损伤失活。【俺们用胰酶消化细胞时可以发现，对于生长多层、成团、堆叠的细胞胰酶的消化能力是非常有限滴，即所谓穿透能力不强，于是我们需要伴随不停的吹打.....，过度的延长时间和增加消化液会明显地造成不可逆滴破坏】所以俺1直建议你先适当剪碎或解剖针挑碎，目的94能够缩短消化时间增加消化液渗透进组织。如果真的找不到解剖针，试试用2只1毫升注射器代替？【滴1滴培养液在载玻片上，然后把组织块挑人，镜下操作是反向的啊，需要练习练习，看看不用消化液，靠纯物理剥离效果怎样？】

2.筋膜去除不干净，妨碍贴壁。

3.加液过多浮力产生影响，早期应该是采用培养基半浸没培养。