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标题:[求助]腺病毒感染293细胞？

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发表于 2012-4-16 14:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]腺病毒感染293细胞？




本人是新手，现在在293细胞上扩增腺病毒。第一天293细胞生长成单层后在25cm2培养瓶中加入约500微升腺病毒上清液（因为怕病毒滴度不高，所以加的量比较大），第二天下午发现细胞变大变圆，间隙增宽，培养液变黄，因为之前没有做过这个，所以不太清楚是否是病变。给予换液处理，但是换过液以后就发现细胞脱落了，因为不知道到底病变没，所以没有收获该液体。第三天发现就变浑浊了，只好丢掉。
请问高手，293细胞扩增腺病毒一般多久就开始病变？病变时什么样子的？还有就是多长时间可以完全CPE，可以收获病毒？怎样才能在换液后不脱落？或者中间就不换液？期待老师的回答，谢谢！
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utt0989[使用道具]
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发表于 2012-4-16 14:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

这个理论上是，病毒1加入细胞液9开始侵入感染部分细胞，然后病毒扩增释放出来在感染未受感染的细胞，直到没有可感染的细胞为止。

所以时间的长短是个细胞数跟病毒量以及毒力（感染能力）的效应关系问题，并不是1起开始同时结束这样简单，是随病毒数量的增加逐步加深的。

加入病毒后9不能在换液啦。
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发表于 2012-4-16 14:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

谢谢回答。那我想再请教一下，加病毒后不换液培养基变黄了不是表示没营养了吗？还可以继续培养吗？还有就是细胞完全病变时是什么样子的啊？能不能传一张图片上来，万分感谢！
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发表于 2012-4-16 16:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

培液变黄，细胞肿胀脱落就可以收病毒了，
你换液干吗，汗。。。
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发表于 2012-4-16 16:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
因为之前我们用HEL扩增CMV的时候，培养液变黄就要换液了，所以我以为扩腺病毒也是一样的......
谢谢啦，我真的是不知道，网上也没找到相关的图片，再次感谢
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发表于 2012-4-16 16:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

看一下我拍的细胞图片，正常的293细胞，下边还有加了病毒的，大家给分析一下，谢谢


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发表于 2012-4-16 16:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

这个是我加了腺病毒两天的照片


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发表于 2012-4-16 16:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这张也是，似乎没病变啊？很郁闷！


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 小中大

看起来是没病变，病变的293会变圆、分散、脱落下来。
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发表于 2012-4-16 16:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

感染48小时的？要这么看这株病毒的毒力似乎不强啊？
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