小中大我所加的药物是抑制细胞生长的，我养的是肝癌细胞HepG2,按照我的参考文献上所说是每孔接种50000个细胞，24小时后加药，加药4天后进行MTT检测。
楼上的XDJM们都说50000个是细胞个数，但是我觉得是细胞密度，我以细胞个数50000个去接种，接种200ul,也就是以2.5*105的细胞密度去接种，24小时后就长满了80-90%，然后我再加药，如果再培养4天后，对照组的细胞就会太满；而以细胞密度50000去接种，24小时后长满50%，然后加药，如果中途不换液培养4天，我的问题是：
1.4天后进行MTT检测时对照组细胞已长满》100%，在这种情况下我是应该减少每孔的接种细胞数，使检测前达到80—90%还是不用处理，这种情况对检测结果会有什么影响？
或者我不培养4天，而是培养48h或者72h,使对照组细胞长满80-90%就进行检测，但是文献上说是4天，在上述两者矛盾时，我是以接种细胞数为主还是以培养时间为主？
2.4天内不换液的话，4天后培养液里的营养成分已被消耗尽，这会对MTT检测结果会有什么影响？
由于刚开始尝试做实验，有太多的东西不懂，请前辈们多多指教！
