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标题:[求助]这是传说中的“黑胶虫”吗？（有图）

yes4[使用道具]
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发表于 2012-4-17 12:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]这是传说中的“黑胶虫”吗？（有图）



小弟从1月中旬开始被这中污染困扰...第一次出现的时候将所有的培养基全部换掉，重新领的血清，重配的完培，后来细胞长的不错。小弟是做原代培养的，传代也进行不错，可是上周开始培养皿的底部有出现类似的小黑点，赶紧换培养基，冲洗，第二天还是不行：小黑点铺满背景，培养基开始浑浊，细胞也...这次我们细胞房有3组细胞都出现了同样的“小黑点”。我总结特点如下：一开始小黑点不密集，但会迅速增加，40×视野下可见圆点样或短棒状，做原地的抖动（附图）。
请教：这是传说中的“黑胶虫”吗？正确的处理程序是？重换血清是否可以解决这个问题？可能是实验操作引起的吗？比如用枪的时候偶尔不小心将液体吸入枪身但未处理枪头？
小弟很崩溃...养细胞已经快4个月了，一点结果都没有拿到呢，怎么像老板交代，而且这次的污染使我损失了好大一批细胞，我又白费了1个月的努力。由于是元原代培养，没有冻存的细胞，只能重头再来，天哪！请各位师兄师姐给我指条明路吧，谢谢！！！


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2012-4-17 12:50
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yes4[使用道具]
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发表于 2012-4-17 12:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
图中类似短棒状的，大部分其实是几个圆点连在一块的，基本是圆点状的，还有少许短棒状的，分布很密集时“小黑点”的形态反而没有上图看的清楚。
上图是40×的视野图。多提建议啊..
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yes4[使用道具]
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发表于 2012-4-17 12:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

低倍镜下是“黑色的小点”，高倍镜下则像上图那样类似半透明的。
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abc816[使用道具]
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发表于 2012-4-17 12:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

没见过。但据说这种现象在中国的实验室很普遍。有说是支原体，有说是一种细菌，总之都是和细胞竞争培养基。密切关注中。。。。。。
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HP007[使用道具]
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发表于 2012-4-17 12:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你这个显然不是什么黑胶虫，是细菌污染。
无菌操作要规范，灭菌啊，照紫外啊什么的要做好。
最后就是原代培养要特别小心。取材过程中抗生素浓度可提高到10倍左右，及冲洗或漂洗都用10倍抗生素的PBS。当然要根据你自己的情况。
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发表于 2012-4-17 12:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

是细菌污染
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发表于 2012-4-17 12:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不像是黑胶虫污染
培养基变黄，有无混浊？
提个建议：既然进行了4个月左右的传代培养，为什么不在细胞状态好的时候冻存几支呢？这就好像写文章要及时保存一样，切记。
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发表于 2012-4-17 12:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

这绝对不是黑胶虫，我可以保证，黑胶虫是虚无缥缈的东西，但是你这些污染倒是很典型的球菌污染，操作的时候还是要注意！！！
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tianmei001[使用道具]
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发表于 2012-4-17 12:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

明显是细菌污染
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发表于 2012-4-17 12:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

就是细菌污染，传说中的小黑点不会引起培养基浑浊的，也不会这么大这么多
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