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标题:[求助]细胞中出现沙粒状的东西，怎么办

pencil菲[使用道具]
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发表于 2012-4-20 12:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]细胞中出现沙粒状的东西，怎么办




细胞培养过程中出现小的沙粒状的东西，但是细胞生长还是比较好的，形态也没有变化，培养液清亮，但是如果3天左右不传代细胞会死亡，是怎么回事啊?请高手指点
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dog002[使用道具]
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发表于 2012-4-20 12:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

3天不传代可能细胞生长比较旺盛，因而出现生长抑制而飘了。与你的沙粒状物质没有直接关系。
楼主问题的关键是想问沙粒状物质是什么，会不会直接对细胞生长产生什么有害影响。

本人认为楼主细胞的培养基清亮，应该可以排除污染，因为无论是什么污染物质的存在，都会直接对细胞造成毒害影响，细胞脆片增多，坏死增多，加上污染生物的扩增，肯定会有不同程度的培养基浑浊存在，所以楼主的细胞单从他描述来说，不会是污染

单然，是不是污染除了与楼主的描述有关外，还需要继续观察

至于沙粒状物质是什么，有一种可能是变性的血清蛋白或纤维蛋白之类的东西。

最终确定是什么还要继续观察，并且最好发图片，并描述更加生动和细致些
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pencil菲[使用道具]
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发表于 2012-4-20 12:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

可是沙粒状的东西会越长越多，在高倍镜下观察沙粒状的小黑点会动。后来就扔掉细胞了，再复苏传代后又出现同样的情况，刚养细胞，不知道是怎么回事。
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dog002[使用道具]
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发表于 2012-4-20 12:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

重新配制液体，用一次性吸管和培养瓶，细胞株从新获得，可以排除污染
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zhezhe[使用道具]
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发表于 2012-4-20 12:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
可是沙粒状的东西会越长越多，在高倍镜下观察沙粒状的小黑点会动。后来就扔掉细胞了，再复苏传代后又出现同样的情况，刚养细胞，不知道是怎么回事。

_____________________________________________________________________________________________________________

据你的描述很像是黑胶虫污染！黑胶虫污染后，繁殖很快，用冲洗的方法去除不了，数量少的时候不会很大程度的影响细胞生长,但是数量多了之后会影响细胞繁殖速度的！所以还是建议如果细胞不是很珍贵的话，扔掉从新复吧！我们实验室有个师姐为救一株很珍贵的细胞，耗费了一个月，最终还是放弃了！很可惜啊！如果再复苏又出现这种情况的话，也有可能是冻存细胞的时候就已经感染这种黑胶虫了！
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dog002[使用道具]
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发表于 2012-4-20 12:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

如果像楼上所述是黑蛟虫，我建议欢进口血清好些
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发表于 2012-4-20 12:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我就是再次复苏了之后又出现这种情况的啊，影响实验进展，现在饭都吃不下。555555555555，什么时候才能好起来啊，我用的是GIBICO的血清，今天早上认真看了一下血清里面有白色的絮状物，当时就晕死了，因为昨天复苏了一株细胞，就是用的那个血清配的，怎么办啊，如果细胞也被污染了，我就没有细胞可以复苏了
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发表于 2012-4-20 12:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
血清里有絮状物只要不是整瓶浑浊，一般是由于蛋白沉淀，可放心使用。
我原来比较相信黑胶虫，后来我觉得可能是细胞碎片的可能性比较的大，细胞状态不好的时候
会有。这样的碎片在细胞分裂旺盛的时候影响不大，如果细胞本身长的慢，有时候会影响的。
传代的时候尽量的轻柔，不要人为的用机械力破坏细胞。

————————————————————————————————————————————————————————————————

“我原来比较相信黑胶虫，后来我觉得可能是细胞碎片的可能性比较的大，细胞状态不好的时候会有”当然，细胞状态不好的时候可能是细胞碎片太多影响了细胞的生长和繁殖，但是您有没有注意到LZ说的“可是沙粒状的东西会越长越多，在高倍镜下观察沙粒状的小黑点会动”，这个更像是黑胶虫污染的征象，而不太像是细胞碎片在细胞培养中的征象啊！我也只是根据LZ说的推测而已，大家说呢嘿嘿
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发表于 2012-4-20 12:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

细胞裂成碎片的时候，细胞内容物如溶酶体什么的会出来
会影响更多的细胞的状态。其实这样可以解释为什么这样的沙会越来越多。
如果有碎片的话，细胞种的少，没多久就全部死掉了。但是我做过这样的事，
整瓶细胞都死掉以后，视野中的所谓黑胶虫并不能增殖，不会越长越多。
放了一周还是原来那个样子。除非说它是某种寄生物，但如何解释在商品化血清中
能够维持这么久的生命呢。
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 小中大

哦，这样啊，又学到了一点！但是沙粒状的小黑点会动呢？这样还会是什么情况下出现呢？谢谢各位高手指点，谢谢
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