小中大再请教3T3-L1的分化
我做的时候是没有出现你说的细胞干了的状况的，我换液的时候是在酒精灯下风口，不过是吸一个孔就加培养基；但是我发现沿着侧壁加的时候加快了就容易飘起来，所以我是沿着侧壁慢慢加下去的，这样一块板的时间就要超过半个小时了。总体感觉是时间久了也是个影响因素。
另外，就是到底什么时候才是加诱导剂的最佳时刻？你们一般是让细胞长到什么程度才算是接触抑制的？
我做的飘了的几次都是细胞长到一个挨着一个，没有空隙了，然后再让它长2d才加药，这时候细胞已经重叠交叉了，好像更容易整片飘起来
后来我试了一下细胞高低密度，在低密度铺板差不多长到细胞之间开始接触的时候，再长1天半，然后加药，这个时候低密度细胞基本上是没有重叠交叉的，在药物的作用下，细胞是有收缩的，中间出现镂空，然后收缩成局部一堆一堆的，就是肉眼看24孔板底部，细胞由原来的整层贴壁状变成了网格状，但是至少是没有飘的。现在刚给细胞换第二种分化液，到目前为止，高密度的飘的多，低密度的基本上没飘
