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标题:[讨论帖]瓶口过火问题

铜雀[使用道具]
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[讨论帖]瓶口过火问题



看了很多关于瓶口过火的帖子,大家说法不一,想说下个人的观点:
持否定态度的人认为瓶口过火的弊在于:1,不把瓶口烧红过火根本达不到灭菌效果,“可以拿自己 的手指试试”;
2,装培养液的瓶子瓶口过火会通过温度压力变化会导致碳酸氢钠缓冲系统失效,培养液变碱;
3,国外的实验室看不到酒精灯。
个人认为:1,过火不是指简单的在酒精灯上快速的晃几下了事,而是要缓慢的且旋转的使瓶口通过酒精灯外焰,3-5秒为宜。正常酒精灯的外焰温度是400-500°,细菌不被烧死也会被灼伤(变性的)。
2,正常情况下大家都会把配好的的培养液(粉末的或是液体的)分装成小瓶的(100ML或250ML),这样既可以防止污染后的全部污染又可以在短期内用完,瓶口过火确实可以使培养液变碱但是如果你的培养液分装成小瓶了的话,这个问题就不存在了,如果你的培养液没有分装,长时间瓶口过火确实是要考虑的问题,但是就算你不过火,长时间反复的在台内开瓶口,培养液一样会变碱的。退一步说,就算培养液变碱了又不是不可调的,开口放到培养箱里几个小时,然后再滤过PH保证让你满意。
3,国外的条件和国内的肯定是不一样的,自己想想吧。
再说说瓶口过火的好处吧:瓶口灭菌作用,干热灼烧灭菌的方法早就存在了;同时高温还可以一方面使细菌和尘埃粘附,一方面在瓶颈内产生向上的气流而阻止细菌和尘埃的进入;酒精灯的使用是由实验室的条件所决定的,符合我国的基本国情,不过我相信总有一天酒精灯会告别超净台的。
综上个人建议用酒精灯瓶口过火还是有必要的,以后有时间做个对比试验。。
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xyw5[使用道具]
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我隔壁科他们是一定要过火
我有时后省时间经常不烧,养了半年也只污染过一次
好像不是过火的问题
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tangxin_80[使用道具]
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过火不一定是好事,造成的气流紊乱不利于安全柜中气流平稳
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pencil菲[使用道具]
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过就过呗,又不会死人
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duoduo[使用道具]
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安全柜内不能使用酒精灯
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duoduo[使用道具]
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不过火也一样养的好好的,关键还是无菌操作要严格
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one[使用道具]
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应该不是大问题吧。但为了更加规范,还是每次操作都过火,目前情况都还可以。
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summerxx[使用道具]
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瓶口过火个人认为有必要,时间5秒左右为宜,时间太长破坏培养基的pH,太短起不到灭菌的效果
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园丁##[使用道具]
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瓶口过火是有必要的,这样就可以更好的保证无菌条件,做试验的瓶子和一些用品不可能保证完全无菌的条件,带到超净台内使用,超净台内就不能保证完全无菌的状态。对实验所用的瓶口,首先用75%的酒精擦拭一下,进行消毒,之后再在火焰上烧3-5秒钟,就可以把瓶口的细菌杀灭,再取液过程中,瓶口残余的液体,要及时用酒精棉擦拭干净。
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abc816[使用道具]
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我觉得如果能够保证整个细胞间的环境稳定,自己操作标准能够按照SOP进行,瓶口不过火是可以的。但是楼主的利弊两面是值得借鉴的。
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