[求助]293细胞养着养着就“分化”成两种细胞样了 - 经验共享 - 分析测试百科

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标题:[求助]293细胞养着养着就“分化”成两种细胞样了

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1

发表于 2012-4-26 17:14 资料个人空间短消息加为好友

小中大

[求助]293细胞养着养着就“分化”成两种细胞样了

一种很奇怪的现象！复苏后传几代后往往就出现异样，像是分成了两种细胞，一种比较透亮，个大的，跟正常细胞没多大区别；另一种却变浅，感觉跟背景差不多，而且像河流似的把透亮的细胞包围！而且一旦出现这种情况，往往不可逆，再怎么小心照料都恢复不了正常。怀疑是变浅色的那部分细胞发生了senescence,但染过β－gal并不着色。有高手帮忙分析分析吗？

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2012-4-26 17:14

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发表于 2012-4-26 17:15 资料个人空间短消息加为好友

小中大

一种很奇怪的现象！复苏后传几代后往往就出现异样，像是分成了两种细胞，一种比较透亮，个大的，跟正常细胞没多大区别；另一种却变浅，感觉跟背景差不多，而且像河流似的把透亮的细胞包围！而且一旦出现这种情况，往往不可逆，再怎么小心照料都恢复不了正常。怀疑是变浅色的那部分细胞发生了senescence,但染过β－gal并不着色。有高手帮忙分析分析吗？

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发表于 2012-4-26 17:16 资料个人空间短消息加为好友

小中大

那部分近似透明的细胞贴在培养瓶上，同时变得修长，感觉用胰酶消化很久都不会缩成圆球状

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2012-4-26 17:16

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发表于 2012-4-26 17:16 资料个人空间短消息加为好友

小中大

较高倍镜下的图

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发表于 2012-4-26 17:17 资料个人空间短消息加为好友

小中大

不好意思，这张才是高倍镜

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发表于 2012-4-26 17:17 资料个人空间短消息加为好友

小中大

不好意思，这张才是高倍镜

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发表于 2012-4-26 17:19 资料个人空间短消息加为好友

小中大

细胞过密是会有这样的情况
其实293转了不同的基因后会增加细胞膜的通过性也增加的细胞融合的概率
所以这个细胞就是对细胞密度很敏感
不能太密才传
否则包病毒效果大降

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发表于 2012-4-26 17:19 资料个人空间短消息加为好友

小中大

谢谢
最初我也怀疑是细胞密度的原因，但我试过以前不同批次冻的细胞，发现在细胞密度很大的情况下会满满地层叠着生长，但并不会产生这样“两种”形态差别这么明显的细胞。而且，出现这种情况后再传代，即使密度再稀，也还是会有那种折光率变浅的细胞。更要命的是，时间养得越久，感觉这样细胞所占的比例越多。

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发表于 2012-4-26 17:21 资料个人空间短消息加为好友

小中大

这不挺好么

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发表于 2012-4-26 17:22 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 shenkunjie 于 2012-4-26 17:21 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

这不挺好么

不行啊。如图，黑箭头所示的细胞确实是正常的形态，但红箭头所指的细胞就不太对劲了……

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2012-4-26 17:22

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